荧光法研究Gemini表面活性剂与BSA的相互作用.pdfVIP

第29 胶体与聚畲ll物 V01．29 No．1 al Mar．2011 2011 3 ChineseJouumrnalooftCo o 年 月 id＆＆po—lymer DOI：10．3969~．issn．1009-1815．2011．01．010 荧光法研究Gemini表面活性剂 与 BSA的相互作用 刘 磊 陈凌宇 郑 星 吴 康 冯亚珍 (湖北大学化学化工学院，武汉430062) 摘要：应用荧光法研究了Gemini表面活性剂(G )与牛血清白蛋(BSA)在不同温度条件下的荧光猝灭 现象，利用荧光猝灭双倒数图计算了G 与BSA之间的结合常数，并根据热力学参数确定了二者之间的作 用力类型。用内源荧光法求得它们在 30~C和35C温度下的结合常数分别为Kt=1．01xl0L。mol和K2=5．45x 10Lm·ol～，结合位点数分别为0．9978和0．9977。根据不同温度时的结合常数，求得G。 与BSA的热力学参 数(30℃)为：焓变AH=32．65KJm·ol一，熵变△S=203．56J-molK·～，自由能△G=一29．03KJ·otol～。实验结果 表明，G 主要以动态猝灭的方式使得BSA荧光强度显著降低 ，G 和BSA主要凭借疏水作用结合。 关键词：Gemini表面活性剂；牛血清 白蛋白；相互作用；荧光光谱法 中图分类号：0657．34 文献标识码：A 文章编号：1009·1815(2011)o1-0031—03 蛋 白质一表面活性剂复配体系在化妆品、食 一 1,3一双十四烷基--9基溴化铵(G。牡。)，按文献问 品等领域有着广泛而重要的应用 ，蛋 白质和表面 方法 自制，贮备液浓度为 0．01mol／L；牛血清白蛋 活性剂相互作用的研究是多年来人们一直十分 白(BSA，华美生物工程公司)贮备液浓度为 1．0× 感兴趣的课题 【】。Gemini表面活性剂是一种新型 10mol／L；使用时，用二次水稀释到所需浓度。所 的两亲分子，是由两个亲水基和两个疏水基在其 用试剂未注明均为分析纯，实验用水为二次去离 亲水头基处或靠近亲水头基处由一连接基团通 子水。 过化学键连接而成，比单亲链表面活性剂具有更 1．2 实验方法 多优 良的性质网。对工业生产(例如纺织染整、日用 在 3O℃和35C温度下分别向 1xlcm的石英 化学品生产以及强化采油过程等)而言，表面活性 比色皿中加人 2．9mLBSA储备液，用微量进样器 剂与大分子问的相互作用会显著影响体系的性 逐次加入 2．0xl0-4molL· 的Gl¨l溶液。在荧光 质，例如某些表面活性剂与大分子形成聚集体可 分光光度计上，固定激发光波长为280nm，绘制 使体系的流变性发生显著变化。因而产品的质量 300~500nm的荧光发射光谱图，并记录348nm 与表面活性剂和大分子间的相互作用密切相关。 处的荧光强度。 对生物体系而言，表面活性剂与蛋白质之问的相 互作用将直接影响生命过程。研究Gemnii表面 2 结果与讨论 活性剂与蛋 白质的相互作用对于实际生活生产 2．1Gl 对BSA的猝灭作用 有着重要作用。蛋白质 ．表面活性剂复配体系不 BSA的内源荧光来 自于分子中色氨酸残基 仅在药物、化妆品、生物及食品等领