影响西洋参不定根组培增殖的几种因素及皂苷生产的研究.pdfVIP

第 33卷 第 2期 延 边 大 学 农 学 学 报 Vo1．33No．2 2011年 6月 JournalofAgriculturalScienceYanbianUniversity Jun．20l1 影晌西洋参不定根组培增殖的几种因素及皂苷生产的研究 李慧娟 ， 朴炫春 ， 费丽坤 ， 李美兰 ， 廉美兰 (1．延边大学长 白山生物功能因子省部共建教育部重点实验室，吉林 延吉 133002； 2．延边朝鲜族 自治州农业科学院，吉林 龙井 133400) 摘要 ：为筛选西洋参不定根组培增殖 的适宜培养基 ，研究培养基 中生长素 IBA和 NAA、磷浓度及有机物含量 对不定根增殖生长 的影响，结果表 明，不定根在 IBA5mg／L中生长 良好 ，MS培养基 中固有磷浓度和有机物 含量适合于西洋参不定根 的生长．为有效生产西洋参皂苷 ，利用生物反应器进行不定根与细胞的共培养 ，并与 反应器不定根和细胞培养进行比较，发现共培养时获得的不定根生物量 (鲜重和干重)与不定根单独培养时无 明显差异，共培养的细胞生物量不及细胞单独培养，但共培养的培养物 (细胞+不定根)总生物量大于细胞或 不定根单独培养；测定皂苷含量的结果，共培养时反应器中不论是不定根还是细胞 ，其皂苷含量均高于不定根 单独培养的不定根和细胞单独培养的细胞中的含量；皂苷总生产量在共培养时达到 26mg／L，约为不定根和 细胞培养的2倍．因此，反应器共培养方法在西洋参皂苷的工业化生产有较高的应用价值． 关键词 ：西洋参 ；不定根 ；细胞 ；反应器 ；共培养 中图分类号 ：S567．5 1 文献标识码 ：A 文章编号 ：l004—7999(2011)02—0077一O6 西洋参 (PanaxquinquefoliumL)又称美国人参．原产于美 国东部和加拿大 ，是五加科人参属的多年生 草本植物 ，以根入药．西洋参具有滋补、强心、造血 、健 胃、镇静、降血脂、抗癌和抗衰老等多种医疗作用 ，与人 参相 比，其性较温和 ，是一种珍贵的药材．现代化学及药理学研究表 明，西洋参主要有效成分是皂苷 ，目前 尚 不能进行人工合成_1]．由于西洋参医疗和保健用途很大，需求量逐年增加 ，造成供不应求 ，价格昂贵的局面． 与人参一样 ，西洋参 由于其 自身的生理特性 ，生长缓慢 ，一般需4～6年才能收获人药 ，且种子资源稀少 ]．因 此 ，利用植物组织培养的方法生产西洋参皂苷具有十分重要的意义[3]． 植物组织培养的培养基成分主要包括无机营养、有机成分、植物生长调节剂和碳源 ，培养基成分及供应 状况对培养体的生长及分化影响很大[4~7]，因此 ，该试验研究生长素 IBA和 NAA，磷浓度及有机物总含量 对西洋参不定根生长的影响，旨在获得西洋参不定根培养 的适宜培养基成分．此外 ，利用生物反应器进行不 定根和细胞的共培养，为短期 内大量生产皂苷提供一种新方法． 1 材料与方法 1．1 材料 西洋参组培不定根和细胞培养材料来 自韩 国忠北大学．将在培养皿培养 30d的不定根切成 1cm大小 后用于不定根材料 ；利用悬浮培养 20d的细胞作为共培养 中的细胞材料． 1．2 生长素种类及浓度对西洋参不定根生长的影响 在 MS培养基 中分别加入 1，3，5和 7mg／L 的 Indole一3一butyricacid(IBA)和 1-naphthlceticacid (NAA)后 ，各处理均加入蔗糖 50g／L和琼脂 7g／L，pH值调节为5．8．每个培养皿 (×h：9．0cm×1．5cm) 中装入培养基 25mL，接种9个不定根外植体 (1cm)，每个处理接种 3个培养皿作为重复．在25℃的暗条件 下培养 ，30d后调查不定根 的鲜重和干重． 收稿 日期：201l—O4—2O 基金项 目：延边大学 “2l1工程”3期建设项 目；中韩合作项 目． 作者简介 ：李慧娟 (1985一)，女，吉林公主岭人，延边大学长 白山生物功能因子省部共建教育部重点实验室，在读硕士 廉美兰为通讯作者 ，TelE—mail：mllian@ybu．edu．cn 78 延 边 大 学 农 学 学 报