我国首株噬藻体(蓝藻病毒)的分离与鉴定.pdfVIP

自．显井芋i缱，展 第12卷第9期2002年9月 ∽够／，／j t 我国首株噬藻体(蓝藻病毒)的分离与鉴定+ 赵以军1 程 凯1 石正丽2“ 郭亚新1 祝海燕1 张建红2 刘永定3 1华中师范大学生命科学学院，武汉430079；2中国科学院武提病毒研究所、武汉430071； 3．中国科学院求生生物研究所，武汉430072 摘要 分离得到一株裂解绍线藻和席藻的噬藻体．对该世藻体的研究发现：光照骞哗是感染伊 必需的，但不依赖于盎属离子(如镁离子)；裂解织线藻的周期(27E条件下)为4h，其甲潜伏期为 3h，最后的1h为裂解期，病毒释放量约200PFU／细胞，感染过程中，织线藻均放氧速率急剧弋 峰 此外还发现：40℃下处理10min，噬藻体保持100％活性；50℃下处理1min．失活率小于 25％；50℃下处理torain，失活率为40％；60℃下处理1rain，失活率为85％；60℃下处理 10rain，失活率大干99％．在电子显徽镜下可以观察到此病毒为噬菌体形态，头部直径为52nm， kb 尾部很短，几乎不可见．该噬藻体的遗传物质为最链DNA，基因组约36 关键词 喵藻体蓝藻I南毒织线藻 蓝藻又称蓝细菌．是能进行产氧光合作用的原 种【8J，在“GenBank”中查不到噬藻体基固组的垒 核生物，其中的某些种类也能固定空气中的氮 序列，我国还未见噬藻体分离的文献报道由于我 气…，据推测，地球上蓝藻占生物固氮总量的 国是世界上蓝藻“水华”暴发最严重的国家之一， 20％-“这种既能固定空气中氮气又能固定二氧化 所以分离噬藻体并用于生物防治水华研究的意义与 碳的双重能力，使得蓝藻在地球的碳、氮循环中扮 应用的前景都是显而易见的． 演着极其重要的角色．此外，水体富营养化问题也 本文报道在我国分离的第一株噬藻体，它感染 备受世人瞩目，蓝藻是淡水中形成“水毕”的主要 的宿主为织线藻和席藻，对其他所试验的蓝藻不感 藻类，而“水华”的出现也使碳、氮和磷的循环出 染，具体报道如下． 现了新的变化，这些变化与蓝藻有直接关系近期 1材料和方法 的研究表明，藻类病毒在控制水体初级生产力和有 害藻类水华方面发挥着重要作用【2’“，有人甚至提 1．1噬藻体分离 出了浮游病毒的概念，并首次将藻类病毒作为食物 从不同水体中采集的14个水样，通过045“m J． 链的重要成员加以认识~4 的微孔滤膜，按1：2的体积比接种到用AA培养 藻类病毒分为原核藻病毒(即蓝藻病毒)和真核 基¨1培养的织线藻、鱼腥藻(Am幻“Ⅱ)及念珠藻 藻病毒．两者是完全不同的病毒类群．原核藻病毒 (Nostoc)的混合培养液中．27E下静置培养7d，在 或蓝藻病毒又称“噬藻体”，是一类与噬菌体相似 混合培养物中加入10％体积的氯仿，剧烈振荡 的双链DNA病毒¨o；真核藻病毒则是形态独特的5min，静置，待分层后收集上层水样．将水样分别 多角体的粒子I“．最先报道噬藻体(当时称“藻病 接种到织线藻、鱼腥藻、念珠藻的液体培养物和固 毒”)是在1963年，它感染鞘丝藻(I_”加)。)、席藻 体平板上，在上述条件下培养．24h后发现7个接 (Phormidi“Ⅲ)和织线藻(川∞∞n∞m)，命名为LPP 种了水样的织线藻液体培养物发黄，96h后观察到 藻病毒【7】．尽管噬藻体的发现已有40年，但研究 接种了水样的织线藻固体平板上出现空斑 还不够全