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第六届全国药用植物与植物药学术研讨会
微弱发光测量技术与药用植物抗氧化作用研究
张仲伦刘成祥郑艳华
(中国科学院生物物理研究所 北京 100101Tel:01080791135)
许多药用植物的有效成分具有抗氧化和清除自由基的作用,而那些成分具有这种作用,这种作
用会受到那些因素影响,以及这些作用的药用机理如何都是当前药用植物研究中的重要课题。在抗
氧化能力与自由基反应测试方法中。微弱发光分析是近年发展起来的一项高灵敏度分析技术。BPCL
型微弱发光测覆仪具有高灵敏度和大探测面积的特点,许多学者利用此仪器开展了各个方面的研
究,在有关药用植物抗氧化和清除自由基的作用研究中也得到了初步应用。下面仅列举几篇应用
BPCL发表的论文说明此项技术的应用情况:
1.异丹叶大黄素(ISOR)是从中药射干巾提取的化学成分.是另一芪衍生物.其结构与自黎芦醇很
相似.推测该化合物可能具有与白黎芦醇类似的抗氧化作用.故作者通过多种模型研究ISOR的抗氧
化作用。
肌体在正常代谢过程中通过酶及非酶过程产生多种活性氧(ROS)。过量的ROS如得不到及时
清除.在体内堆积可引起细胞毒性。生物膜上的不饱和脂肪酸(PUFA)最易受到ROS攻击.引发LP0
链锁反应.破坏生物膜结构和功能。在本研究中.CuS04.Phen.VitC.H202系统通过产生OH能引起
的DNA损伤时超微弱化学发光增强.提示ISOR可保护DNA免受ROS的氧化损伤。
2.系统研究了十几种药物的抗氧化作用的规律。由于体内氧化代谢失衡和抗氧化能力下降与衰
老、肿瘤及多种疾病的发生、发展密切相关.因此抗氧化剂被广泛应用于疾病防治.并取得重要进展。
N
药物对D A发光行为的影响反映它们清除活性氧与自由基的能力.其清除能力的大小与药物结构
N
有关.抗氧化剂对D A的保护作用,不仅与其本身活性有关,在更大程度上是由所清除的活性中间
物类型决定.本工作表明抗氧化剂的化学发光分析方法具有简便、快速的特点,并可同时测定大量样
品.对于药物抗氧化能力的研究及其应用有重要参考价值。‘2’
3.柑橘属植物中存在种类繁多、含量丰富的黄酮类化合物,这些黄酮类化合物具有多种生物活
性和较大的药用价值,其在保肝、抗菌、抗肿瘤、昆虫拒食等方面均有较好的开发价值。利用化学
发光法测定了这些黄酮类化合物的抗氧化能力,实验证明胡柚皮中黄酮类化合物作为自由基清除剂
存在构一效关系。是一种良好的自由基清除剂。
4.甘草是目前使用最最大的中药之一。甘草能补脾益气.清热解毒.止咳祛痰.调和诸药。现代药
理研究发现甘草具有抗氧化作用。近年来中草药的药效和清除活性氧的作用受到了注意和重视。研
究发现,不少有效成分具有清除活性氧的功效。甘草中含有丰富的皂贰和黄酮类化合物。生物化学
O O L
发光法测定活性氧(R S)时,一定浓度范围内发光强度(cL)与RS星线性关系。故可用C
O
表示R S的产生量。清除氧自由基的物质可以降低CL,根据cL下降程度可以判断物质清除R
O O H清除能
S的能力。实验发现光果甘草对O2--和H2 2的清除能力均强子乌拉尔甘草,但对·O
力稍弱于乌拉尔甘草。目前在甘草使用的过程中一般不注意甘草的种类,根据光果甘草和乌拉尔甘
O
草对3种RS清除作用的研究结果,在今后甘草的开发应用中如以清除氧自由基为应用目标,则应
尽量使用光果甘草。
5.近十多年的研究证明,红景天具有抗疲劳、抗缺氧、抗辐射、增强免疫力等作用。红景天是
否具有减缓自由基的产生或盲接清除自由基的作用,.迄今为止尚未见报道。本实验通过多种不同方
检测结果中,通过检测·OH攻击DNA伴随DNA氧化降解产生化学发光,不仅观察到红景天提取
物清除·OH的作用,而且问接反应出红景天提取物对DNA的保护作用。用不同方法测定红景天
提取物体外清除自由基的结果,一致反映红景天提取物具有抗氧化作用。因此有必要对红景天提取
物清除体内自由基的情况进行进一步深入研究。
6.选择具有免疫损伤效应的嗜酸细胞(EC)和具有免疫调节功能的人外周血中淋巴细
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