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利用反向遗传技术构建细胞高适应性的H9N2流感病毒.pdf
中国动物传染病学报 2014,22(2): 7-12 Chinese Journal of Animal Infectious Diseases
·研究论文·
利用反向遗传技术构建细胞高适应性的
H9N2 流感病毒
任超超，滕巧泱，申伟霞，李雪松，李国新，杨健美，闫丽萍，李泽君
（中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241 ）
摘 要：H9N2 亚型禽流感病毒通常在鸡胚上增值性能高，但在细胞上增值能力差。为了获得在细胞上高效表达H9N2 亚型禽流
感HA 和NA 抗原的疫苗株，通过反向遗传操作技术将A/Chicken/Shanghai/441/2009 （H9N2 ，SH441 ）的HA 和NA 基因与A/
Puerto Rico/8/34 （H1N1 ，PR8 ）的6 个内部基因进行人工重组，拯救并获得了1 株禽流感重组病毒441-PR8 ，并对它的生物学
特性进行了研究。结果表明，重组病毒441-PR8 株在细胞上的增殖能力明显高于野生毒株SH441，该重组病毒有望成为H9N2
亚型禽流感疫苗研制的候选毒株。
关键词：禽流感病毒；H9N2 亚型；H1N1 亚型；反向遗传操作；重组病毒
中图分类号：S852.659.5 文献标志码：A 文章编号：1674-6422 （2014 ）02-0007-06
DEVELOPMENT OF A HIGH-GROWTH H9N2 REASSORTANT INFLUENZA
VIRUS BY REVERSE GENETIC MANIPULATION ON CELLS
REN Chao-chao, TENG Qiao-yang, SHEN Wei-xia, LI Xue-song, LI Guo-xin, YANG Jian-mei,
YAN Li-ping, LI Ze-jun
(Shanghai Veterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China)
Abstract: H9N2 infl uenza viruses generally grow at high titers in chicken embryonated eggs but poorly in cell cultures. In order to obtain
a H9N2 vaccine virus with high yield of hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) in cell cultures, reverse genetics technique was
used to develop “6+2” reassortant virus (441-PR8). The HA and NA genes of the reassortant virus 441-PR8 were derived from A/Chicken/
Shanghai/441/2009 (H9N2, SH441) and the remaining six internal segments were derived from A/Puerto Rico/8/34 (H1N1, PR8). The
biological properties of the reassortant virus 441-PR8 were characterized. The reassortant virus 441-PR8 replicated more vigorously in
MDCK cells than its parent virus SH441, suggesting that the reassortant virus 441-PR8 may represent a promising vaccine candidate for
H9N2 avian infl uenza.
Key words: Avian infl uenza virus; H9N2 subtype; H1N1 subtype; re
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