利用同源重组建立CHO高表达细胞株.pdfVIP

军事医学科学 院院刊 2007 年 6 月 第 31 卷 第 3 期 BuII Acad MiI Med Sci ，Jun 2007 ； VoI 31 No 3 237 利用 同源重组建 立 CHO 高表达细胞株 ! 邵 伟 ， ， 刘志刚 俞伟源 （ ， 10007 1 ） 军事 医学科学院生物工程研 究所 北京 ［ ］ ： ， ， CHO 。 ： ， 摘要 目的 利用同源重组的方法 克服基 因组位置效应 建立 高表达细胞株 方法 通过弱化 筛选基 因 构建 了 ， CHO ， ， ， 一 系列弱化 筛选基 因的栽体 大规模 筛选 基 因组 寻找转 录活跃 区 并在此基础上构建 同源重组栽体 系统 包括标 记栽体 pExpIorer pTarget 。 ： pExpIorer ， 和打靶栽体 结果 利用带有弱化 筛选基 因的标记栽体 寻找到 了基础 转 录水平较 高 ， UK 10 g ·mI - 1 ·24 h - 1 ·10 - 6 。 并且适 于力压 的细胞 克 隆 报告基 因 的表 达量在力压后稳 定在 ! 细胞 然后 通过 栽体 pTarget CHO 。 ： ， ， 实现 了在 细胞 中的 同源重组 结论 通过 同源重组的方法 有效地克服 了基 因组位置效应 为建立哺乳动物 高表达细胞株提供 了一个新的吏力有效的途径 。 ［ ］ ； ； ；CHO/ dhfr- 关键词 基 因表达 转录活跃 区 同源重组 ［ ］ @786 ［ ］ A 中图分类号 文献标识码 ［ ］ 1000-5501（2007 ）03-0237-06 文章编号 Construction of CHO high expression cell line by means of homologous recombination SHA O Wei ，LI U Zhi-gang ，YU Wei-Yuan ! （Institute of BiotechnoIogy ，Academy of MiIitary MedicaI Sciences ，Beijing 10007 1，China ） ［Abstract ］ Objective ：To estabIish CHO high expression ceII Iine by homoIogous recombination to overcome the position effect of the eukaryotic genome. Methods ：The screen gene was imp