丹参注射液对发育期癫痫大鼠脑源性神经生长因子影响.pdfVIP

JIANGXIJOURNALOFTRADITIONAL CHINESEMEDICINE 丹参注射液对发育期癫 响 ★ 黄秋玲 唐洪丽 (1．浙江省湖州中心医防 京 210oo9) 摘要：目的：观察传统抗癫痫药物苯巴比妥、中药丹参及两 因子(BDNF)的影响。方法 ：戊四氮慢性点燃幼年大鼠成i 预大鼠，同时设立对照组，应用免疫组织化学方法测定大． 果：药物干预均能使癫痫大鼠模型发作减轻及点燃延迟， 药干预组的皮质和海马中BDNF表达增高，较丹参干预组 发作和延缓点燃，可能由于丹参对海马、皮质神经细胞及才 质的平衡，从而改善学习记忆能力。 —_ 关键词：丹参；发育期癫痫；学习记忆；脑源性神经营养因i _ 中图分类号：R742．1 文献标识码 ：A 癫痫(epilepsy，EP)的反复发作和抗癫痫药的长期砬 蓄痫期都塑会性患的造生者认成活认质知量功知功能”能障。碍因的损此的近害问题年可，来，尤能越会其来严是越重未影成多熟响国脑儿内外童的学乃易者感至成性关注每 。 本实验拟观察丹参干预后发育期癫痫大鼠海马 IB质DN中F脑)源变化性神，经以期营为养研因究子癫痫(bra患ni儿d认e·ri知ve损dN害eu和rotr中o药ph辅ic助Facl 癫痫的临床新靶点提供线索及一定的实验依据。 后，各组随机抽取 6只大鼠，4％多聚甲醛灌注固定脑组织 ， 1 动物、试剂与方法 30％蔗糖溶液4℃脱水后 ，沿横轴位垂直切取视交叉至脑桥 1．1 动物和试剂 健康幼年雄性 sD大鼠60只，体重75～ 部分，厚约0．5cm，OCT包埋剂把组织包裹，自视交叉向脑桥 85g(购于南京安立默科技有限公司，实验动物使用许可证 冠状连续切片 (厚度8 m)，每3张取 1张。HE染色和 BD— [证号：SYXK(苏)2005-OO03])，戊四氮 (美国sigma公司)， NF免疫组织化学染色观察皮质和海马区神经元变化。BD- 丹参注射液：1．5s／ml(四川升和制药有限公司)，苯巴比妥 NF免疫阳性细胞计数 ：取每只大鼠取相同部位 3张切片进 钠注射液：0．1g／ml(天津金耀氨基酸有限公司)，BDNF(N一 行的测定 ，光镜下分别计数每张切片海马和额顶叶皮层各4 20)兔抗大鼠多克隆抗体(美国SantaCrutz公司)，山羊抗兔 个视野(4oo×)的阳性细胞，总和除以4作为该切片的的阳 sP试剂盒(北京中衫金桥生物技术有限公司)。 性细胞的计数，再将 3张切片结果平均得到该大鼠的BDNF 1．2 动物模型制备及分组 实验SD大鼠随机分为五组 ：癫 阳性细胞计数结果。同时采用计算机图象处理系统(Image— 痫模型组 (PTZ组)、丹参干预组 (RSM组)、苯巴比妥干预组 Proplus4．5)对BDNF免疫阳性表达强度进行分析。 (PB组)、联合用药干预组(RSM+PB组)、正常对照组 (NS 1．5 统计学分析 实验所得数据均以均数 ±标准差 (士s) 组)。PTZ组 12只，戊四氮点燃模型的建立参考文献 [2]的 表示，组 间差异采用成组设计两样本均数的 t检验，应用 方法，每 日予无菌生理盐水现配 15ms／na戊四氮溶液亚惊厥 SPSS11．5软件进行统计学分析，P0．05为差异有显著意 剂量(3Omg／ks)腹腔注射；RSM组 12只，每日在注射戊四氮 义 。 前半小时腹腔注射丹参(10mg／kg)；PB组 12只，每 日注射 2 实验结果 戊四氮前半刁时腹腔注射苯巴比妥 (60mg／ks)；RSM+PB 2．1 动物行为学观察 Ns组实验过程中无任何发作迹象 组l2只，每日注射戊四氮前半小时腹腔注射苯 巴比妥 (60 和抽搐表现 ，行为正常。PTZ组大鼠在实验 9天开始，注射 mg／kg)及丹参 (10mg／kg)；NS组 12只，每 日予生理盐水 戊四氮后经过数分钟的潜伏期 ，大鼠由自由活动状态逐渐转