鬼臼毒素诱导胃癌细胞株SGC-7901凋亡的实验研究.pdfVIP

江西中医药 2010年 1O月第 10期总41卷第 334期 鬼臼毒素诱导胃癌细胞株 SGC一7901凋亡的实验研究 ★ 季宇彬 尹立 汲晨锋 (1．国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心 哈尔滨 150076； 2．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心 哈尔滨 150076；3．哈尔滨商业大学药物研究所博士后科 研工作站 哈尔滨 150076) 摘要：目的：研究鬼臼毒素诱导 胃癌细胞株SGC-7901凋亡，为鬼臼毒素用于临床治疗胃癌提供依据。方法：用不同浓度的鬼臼 毒素处理 SGC-7901细胞后 ，采用M1Tr比色法检测其对 SGC一7901细胞增殖的抑制作用；采用流式细胞术检测细胞周期分布和 细胞的凋亡率；用Hoechst33258染液染色，在荧光显微镜下观察细胞凋亡形态。结果：鬼臼毒素可以抑制 SGC-7901细胞增 殖，呈剂量依赖性。能够诱导SGC-7901细胞凋亡，并使SGC-7901细胞阻滞于G2／M期 ，细胞凋亡率呈剂量依赖性。通过荧光 显微镜可以明显的观察到凋亡小体。结论：鬼臼毒素能抑制 胃癌SGC-7901细胞的增殖，诱导SGC-7901细胞凋亡，此为鬼臼毒 素临床治疗 胃癌提供 了科学依据。 关键词 ：鬼臼毒素 ；SGC7901胃癌细胞 ；凋亡 中图分类号：R735．2 文献标识码：A 肿瘤 (tumor，neoplasm)是一类常见病、多发病 。 1．1．1 细胞系 胃癌 SGC-7901细胞株 由由哈尔 恶性肿瘤已成为危害人类健康最严重的疾病之一。 滨商业大学生命科学与环境科学研究中心提供。 世界卫生组织(WHO)公布的数据显示，目前全球恶 1．1．2 试剂 由西安和霖生物工程有限公司提供 性肿瘤死亡人数高于艾滋病、结核病和疟疾死亡人 的纯品( 98％)鬼臼毒素；羟基喜树碱 (HCPT)，购 数的总和。国际抗癌联盟 (UICC)主席卡瓦利在世 自哈尔滨圣泰药业，批无水乙醇 (分析 界卫生组织和国际原子能机构举行的一个研讨会上 纯)，天津市东丽区天大化学试剂厂提供 ；胎牛血 说，如果不采取有效的预防措施 ，发展中国家面临的 清，购 自杭州四季青生物工程材料有限公司；1640 恶性肿瘤防治形势越来越严峻。据预测在未来 l0 培基粉末，购 自HyClone公司；胰蛋 白酶，购 自In． 年内全球约有 70％的新增恶性肿瘤病例将出现在 vitrogen公司；Na2HPO ·12H2O(分析纯)，购 自天津 发展中国家…。由于恶性肿瘤危害的严重性以及 市东丽区天大化学试剂厂；KH：PO (分析纯)，购 自 其不断发展的趋势，征服恶性肿瘤已经成为全球性 莱阳化工实验厂；NaC1(分析纯)，购 自天津市东丽 卫生工作者的一项艰巨的任务。 区天大化学试剂厂；KC1(分析纯)，购 自哈尔滨市新 鬼臼毒素(podophyllotoxin，C：H O8)及其衍生 达化工厂；溴化 四氮唑蓝 (Mar)，购 自Sigma公司； 物具有抗癌活性 ，其 中的糖苷衍生物鬼 臼乙叉苷 二甲基亚砜(分析纯)，购 自天津市博迪化工有限公 (etoposide，VP16，又名依托泊苷)和鬼臼噻吩苷 (te． 司；甲醇(分析纯)，购 自天津市东丽区天大化学试 niposide，VM26，又名特尼泊苷)的临床效果优越已 剂厂；Hoechst33258染色液、碘化丙啶(PI)、RNase 被证实，是治疗睾丸癌、淋巴癌、白血病、小细胞肺癌 A，购 自Sigma公司；Triton—X一100，购 自哈尔滨制药 的重要药物。但是，鬼 臼毒素抗 胃癌作用的研究国 六厂。 内报道很少_2J。为此，本研究采用体外细胞培养的 1．1．3 仪器 DL—CJ-1N超净工作台，购 自北京东 实验方法，探讨鬼臼毒素诱导 胃癌细胞株 SGC-7901 联哈尔仪器制造有限公司；CO一150CO 培养箱，购 细胞凋亡的作用，为鬼臼毒素临床治疗 胃癌提供理 自美国NBS公