HPLC_ELSD测定柏子养心丸中黄芪甲苷的含量.pdf

·202 · Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology ，2011 March，Vol．22 No．2 [1-3] 和衍生化方法均参考有关文献 ，经PMP 空白试验 3.4 藤三七多糖的PMP 衍生物，用上述色谱条件检 证明，残留的PMP 峰与各单糖组分分离良好，不影 测，对比常用单糖标准品经衍生化后的HPLC 图谱进 响单糖的测定。且本文对多糖的水解及衍生化条件进 行分析，其中D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳 行了优化，对藤三七多糖水解时间、PMP 衍生化试 糖、L- （+）-树胶醛糖的色谱峰与藤三七多糖PMP 衍 剂用量、PMP 衍生化温度、PMP 衍生化时间、PMP 生物的色谱峰峰位一致。故最终确定了藤三七多糖的 衍生化萃取剂用量进行考察，确定了最佳衍生化条件 各单糖组成，为藤三七多糖的进一步结构分析和活性 为多糖水解8 h，衍生化试剂PMP 用量为50 μL ，反 研究奠定基础，也为今后研究藤三七的药用价值提供 应温度80 ℃ ，反应时间40 min ，萃取剂氯仿用量为 参考。 200 μL。 3.2 色谱条件的选择 本实验考察了在流动相中加入 参考文献： 磷酸盐和醋酸铵。实验结果表明，采用醋酸盐缓冲液 [1] DAI J，ZHU S ，TANG J ，et al. PMP pre-column derivatization high 作流动相时，各单糖组分得到了较好的分离，峰形对 performance liquid chromatography analysis of Dunaliella salina monosaccharide composition of polysaccharide[J]. J Instrum Anal （分 称。在流动相的pH 选择上，本文考察了pH 值对实 析测试学报），2007 ，26 （2）：206-210. 验的影响，结果表明流动相的pH 改变对保留时间和 [2] MA DY，CHEN J，LI P ，et al. Pre-column derivatization high per－ 峰形影响明显，当pH 为5.5 时，色谱峰各组分保留 formance liquid chromatography analysis of the monosaccharide com－ 时间适中，分离效果最好。最终确定以乙腈-20 position ofpolysaccharides [J]. AnalChem （分析化学），2002 ，30 mmol ·L-1 醋酸铵缓冲液（22 ∶ 78 ，v/v）（pH=5.5）为洗 （6）：702-705. 脱系统。 [3] 戴军，朱松，汤坚，等. PMP 柱前衍生高效液相色谱法分析杜氏 盐藻多糖的单糖组成[J]. 分析测试