日本血吸虫凋亡诱导因子SjAIF功能区片段的克隆及表达分析.pdfVIP

中国人兽共患病学报 102 Chinese ofZoonoses 2015，31(2) Journal DOI：10．3969／cjz．j．issn．1002—2694．2015．02．002 日本血吸虫凋亡诱导因子 研AIF功能区片段的克隆及表达分析 陆 看1’2，韩宏晓2，洪炀2，马茜茜2，刘艳涛2，韩倩2，马 帅2，傅志强2，林矫矫2’3 应用 摘 要：目的 克隆表达日本血吸虫凋亡诱导因子($AIF)功能区片段，并对其生物学特性进行初步分析。方法 PCR技术扩增日本血吸虫凋亡诱导因子的功能区片段，构建原核重组表达质粒并诱导其表达，实时定量PCR分析其在不同 该蛋白在虫体内的分布情况。结果 克隆了$AIF功能区片段，大小为83lbp。成功构建了原核重组表达质粒pET一28a (+)一jAIF，并在大肠杆菌中获得表达，重组蛋白分子量35 d～21d虫体表达量较低，42d和28 育阶段均有转录，其中7 d虫体表达量较高，雌虫表达量高于雄虫。重组蛋白具有较好的 抗原性和免疫原性，免疫小鼠后诱导产生了较高水平的特异性19G抗体。该蛋白主要存在于日本血吸虫体被，少部分分布于 实质组织中。结论 成功表达了SjAIF基因的功能区片段，对其生物学特性进行了初步分析，为进一步研究该基因生物学功 能和作用提供了基础。 关键词：日本血吸虫；细胞凋亡；凋亡诱导因子 中图分类号：R383 文献标识码：A 文章编号：1002—2694(2015)02—0102—07 and ofafunctional Cloningexpressionanalysis fragment of in apoptosis—inducingI■ctor(AIF)gene LU Kanl～，HAN Hong—Xia02，HONGYan92，MAQian—qian2， LIU Yan—ta02，HANQian2，MAShuai2，FU Zhi—qian92，LINJiao—jia023 n趋dE竹口iro挖，ne竹tnZ Nor，n口Z (1．CozZeg已o，Li／0 SciP竹cPs，S^nng^niU行iwrsify，S^口ng^ni200234，(、^i，z口； 5fi8挖fg 2．S五8糌g矗口iV≥￡￡ri露口ry尺es∞，℃是j豫s￡i￡甜据，C是i纷口58Af8矗P撤岁o，Agrif“Zf“，‘nZ 200241，C^i打n； ／KeyLn60r口￡oryo，A挖i7”口ZP口，u5i￡oZogy，A以竹is￡ryo，Agric“￡￡“rP，S^口挖g^ni Pr已t肥n￡io扎n行dCon￡roz 3．Ji口n9