G2期早熟染色体凝集技术预测肝癌细胞低LET射线辐射敏感性.pdf

第28卷第11期 核 技 术 V01．28，No．11 NUCLEAR November2005 2005年11月 TECHNIQUES G2期早熟染色体凝集技术预测肝癌细胞低LET 射线辐射敏感性 杨建设1，2赵靖1，2李文建1高清祥3王转子1，2 1(中国科学院近代物理研究所兰州730000) 2(中国科学院研究生院北京100049) 3(兰州大学生命科学学院兰州730000) 摘要用60Co产生的Y射线照射人肝癌细胞系SMMC．7721。以克隆形成法测定经照射后的细胞存活率，用化 chromosome 学诱导剂Calyculin．A诱导的早熟染色体凝集(Premature 伤。结果显示G2期细胞内的染色单体和等点染色单体断裂数与照射剂量之间存在着线性相关性，染色单体断 裂数与细胞存活率之间存在较好的线性相关性。表明辐射诱导的染色单体断裂可以作为预测SMMC．7721细胞 内在辐射敏感性的指标，也可为临床诊断和治疗肝癌提供依据。 关键词早熟染色体凝集技术，预测，肝癌，辐射，效应 中图分类号Q813．5，TL99 癌症是致死率很高的疾病之一。精确的肿瘤放 射效应的预测分析方法不仅可以为癌症的治疗提供 理论依据，而且能够给临床医生选择诊疗方案提供 箱内培养。 极大的帮助。 克隆形成法是一种常用的研究肿瘤放射效应的 1．2 细胞照射 方法之一[1-31，但是作为一种常规的方法，它至少 指数生长期的SMMC一7721细胞在兰州医学院 需要两到三周的时间才能形成克隆斑，这对于临床 第一附属医院用60Co源产生的丫射线(剂量率 诊断和治疗就不太可行。 0．2Gy／min)进行照射。 自从Johnson【4J应用早熟染色体凝集 chromosome (Premature condensation，PCC)技术研 1．3 PCC方法和染色体制备 究放射诱导的染色体损伤以来，早熟染色体凝集技 术已经成为一种研究辐射诱导各细胞周期时相染色 体原初损伤的成熟的方法15,6】，尤其在G2期，这良好的PCC诱导剂，将其溶于100％的乙醇里制成 一技术效果更佳。文献【3】、【5】一【11]报道了不同种1 mmol／L的储存液。照射前将其加人需照射细胞的 类的细胞系经不同种类的射线如x射线、Y射线以 nmol／L。细胞经照射后在 培养液内，终浓度为50 及重离子束照射后表现出了线性剂量依赖关系。我 37。C，5％C02的恒温培养箱内继续培养30min。收 们采用化学诱导的早熟染色体凝集技术对人类肝癌 mmol／L 集细胞，75 细胞系SMMC．7721进行了Y射线的放射效应研究。 液固定，最后以少量固定液悬浮细胞，滴片，在热 蒸汽上烘干，5％Giemsa染色。 1材料和方法 1．4 染色体观察、计数 1．1 细胞培养 人类肝癌细胞系SMM