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福建畜牧兽医 第27卷 增刊 2005年 5 免疫胶体金快速诊断技术在兽医临床 诊断中的应用和研究进展 王武军1 金颜辉2蔡开珍1 1．福建出入境检验检疫局技术中心3500012．福建省畜牧兽医总站350003 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 摘要：免疫胶体金快速诊断技术(快速斑点免疫金渗滤技术和胶体金免疫层析技术)在生物医学各领域的应用日益广泛，本文重点介绍该技术 在动物医学领域猪病、禽病快速诊断中的应用和研究进展，并对该技术将来在动物疾病检测中的应用趋势做出预测。 关键词：免疫；胶体金；兽医；诊断技术 胶体金标记技术作为四大标记技术之一，因其 技术，其原理与快速斑点免疫金渗滤法基本一致，只 独特的优点近年已在生物医学各领域得到深入研究 是将原来的渗滤改为层析。该技术将胶体金标记的 和广泛应用。基于酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶已知抗原或抗体包被在特定载体的特定位置上，样 乳凝集试验、单克隆抗体技术、免疫胶体金技术和新 品中抗体或抗原经层析作用移动至该特定位置时， 材料技术建立的免疫胶体金快速诊断技术[快速斑 与胶体金标记的抗原或抗体特异性结合，在特定位 filtration 置由胶体金显色来指示样品中抗体或抗原的存在与 点免疫金渗滤技术(Dot—immuogoldassay 否。该技术既可采用双抗体夹心法检测样品中抗 DIGFA)和免疫层析技术(immunochromatography)， 因其简单、快速、准确和无污染等优点，在医学临床 原，又可用间接法检测样品中抗体。 检测、激素检测、滥用药物检测、抗原抗体检测等诸 2 在动物疾病快速诊断中的应用与研究 多诊断领域推广应用迅速¨。】。在动物医学领域， 2．1 猪病2．1．1猪瘟猪瘟是由猪瘟病毒引 免疫胶体金快速诊断技术已经应用于猪瘟、猪繁殖 起的以急性出血和发热为主要特征的传染病，被世 和呼吸综合征、禽流感、新城疫、传染性法氏囊病等 界动物卫生组织(OIE)列为A类动物传染病。临床 的抗原检测或抗体监测。本文就该技术目前在动物 常采用接种疫苗的方法来控制猪瘟。规模化猪场有 疫病快速诊断中的应用和研究进展作一综述。 效预防和控制猪瘟需定期进行猪瘟病毒抗体监测。 1 检测原理 目前，实验室常用猪瘟病毒抗体检测方法有ELISA、 氯金酸(HAuCI。)在还原剂作用下，可聚合成一猪瘟正向间接血凝试验、Dot—ELISA等。基于胶体 定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液。溶液 金免疫层析方法和斑点免疫金渗滤法开发的猪瘟抗 中的金颗粒呈圆形，边缘平滑，完整，界线易于确定。 体诊断试剂近年已在兽医临床上广泛应用。 由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。 黄印尧等¨3以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜的 胶体金颗粒表面所带的较多电荷使其对蛋白质有很 检测区，在下端附着胶体金标记的猪瘟抗原，组成免 强的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋 疫金标试纸条，根据胶体金免疫层析原理，用该纸条 白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多 建立检测猪瘟抗体的免疫金标检测法。用该检测法 肽缀合物等非共价结合，形成胶体金蛋白。借助具 与Dot—ELISA及间接血凝法对298份猪、鸡、鸭、鹌 有高电子密度特性的金颗粒作为标记物，当金颗粒 鹑、兔、鼠、羊血清进行猪瘟抗体检测，结果符合率达 在固相载体上抗原抗体反应处聚集达到一定密度 100％。孔繁德等喁3以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜 时，可出现肉眼可见的粉红色斑点。所以胶体金作 ，然后用胶体金标记SPA，