2-α-(5%27-溴-4%27-氯-吲哚-3%27-氧)-唾液酸苷%3a病毒唾液酸酶活性测定显色底物的合成的研究.pdfVIP

2．仪一(5’．溴一4’一氯埘I哚一3’．氧)．唾液酸苷：． 病毒唾液酸酶活性测定显色底物的合成研究 ’ 李卓荣· 刘宗英姜威汤雁波． (中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所北京天坛西里l号100050) 捕要2a?(5’·溴．4’-氯-吲哚．3’·氧)-唾液酸苷具有唾液酸酶底物性质，在流感病毒唾液酸酶作用下水解生成的5． 溴-4．氨-3．羟基吲哚自动聚合，产生兰色。通过测定唾液酸酶的活性可诊断病毒感染。本论文对显色底物2a．(5，．溴．4’． 、 氯．吲哚．3，．氧)．唾液酸苷的合成工艺进行了研究．确定了操作安全方便、更适宜子大量制备的合成工艺。 关键词 唾液酸酶；显色测定；底物合成 ． 感染性疾病是医院就诊率最高的疾病111，其中，病毒性感染又占首位。最常见的病毒性感染为呼 吸道感染，如流感、副流感、合胞体病毒及腺病毒感染等，流感是头号呼吸系统疾病。进行快速有效 地诊断是实施有效治疗的重要前提。但是，临床所使用的诊断手段仍然是传统的由病毒产生抗体的抗 原性来进行诊断，虽然准确性较高，但速度慢、适用范围窄。因此，开发方便、快捷和准确的诊断方 法仍是临床的迫切需要。 在流感病毒的生命循环中，病毒表面的神经氨酸酶对于流感的侵入和传播具有非常重要的作用【冽。首 先，病毒颗粒表面的血凝素蛋白与靶细胞表面的糖蛋白分子一唾液酸键合：该键合诱导细胞吞噬病毒，被 吞噬的病毒基因和内在蛋白在细胞内很快游离出来，并进入细胞进行复制。复制产生的新的基因和蛋白组 装成新的病毒颗粒。病毒表面的神经氨酸酶将病毒血凝素与细胞唾液酸的键合断开，从而使病毒颗粒得以 游离并侵入其它的细胞。因此。流感病毒感染者呼吸系统的神经氨酸酶浓度明显升高，通过检测患者痰液 中神经氨酸酶的活性，进行快速有效地诊断，以便实施有效治疗。含有显色底物2a-(5’．溴_4’．氯．吲哚．3’． 氧)．唾液酸苷(1)的检测试剂盒，在神经氨酸酶作用下糖苷键断裂游离出的5．溴．4．氯．3．羟基吲哚(3)， 在环境氧作用下发生二聚产生靛蓝色二聚体(4，图1所示)o该二聚体不溶予水，在测定条件下自动聚集 产生明显兰色反应，提高检测的灵敏性。另外，由于不同流感亚型均具有神经氨酸酶，显色检测适用范围 广。即含有显色底物2c【_-(5’．溴-4’一氯-吲哚．3’．氧)-唾液酸苷的检测试剂盒，具有适用范围广、诊断快速、灵 敏和准确的特点，是一种新型实用的检测手段。 ‘ H H 8’ 塑!堡苎!匝g自塑 hydrolyas， oH 3 4 ． 图l显色底物的显色原理 ‘ 关于底物．2值．(5’一溴-4’-氯-吲哚一3’-氧)一唾液酸苷的合成已有文献报道【“】。文献方法为以唾液酸(2) ～■‘’二’1 李卓荣(1962)，女。研究员(硕士生导师)，药物化学专业。 Tel：010Fax：010E·mail：!-z-r@．263．net 67 为起始原料，先干碱催化下与