利用启动子缺陷型打靶载体敲除牛胎儿成纤维细胞中的Prnp.pdf

生物工程学报 ChinJBiotech2008．November1)：1988—1992 25；24(1 ChineseJournalof ISSN1 journals．im．ac．cn Biotechnology000-3061 cjb@im．ac．cn @2008Instituteof reserved Microbiology,CAS占CSM,Allrights 利用启动子缺陷型打靶载体敲除牛胎儿成纤维细胞中的 朱采红1，俞国华2,3，李蓓1，许媛媛2，俞慧清2，陈建泉2，钱曼3，成国祥1，2 l 同济大学生命科学与技术学院，上海200092 2上海转基因研究中心。上海201210 3华东师范大学生命科学学院．上海200062 摘要：利用启动子捕获对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一．敲除动物的P唧可使其具 电穿孔转染牛胎儿成纤维细胞BFF,用250 行PCR，测序及Southern 一条等位基因被成功敲除。本研究为牛尸唧的敲除提供了一种简单、安全、有效的方法． 关键词：基因打靶，启动子捕获策略，Prion病，牛胎儿成纤维细胞，P，，妒 BovineFibroblasts TargetingPr印in byPromoter—trap Strategy Zhul，GuohuaYu2∥，Bei Chen2， Caihong Lil，YuanyuanXu2，HuiqingYu2，Jianquan Min Qian3，andGuoxiangChen912 and I School Science 200092．China ofLife Technology，TongjiUniversity，Shanghai 2 Research 201210，China ShanghaiTransgenicCenter,Shanghai 3School ChinaNormal Science，East 200062，China ofLife University，Shanghai for colonieshasbeen used toelevatethe in Abstract：Promoter-trapstrategyenrichingtargeted usually genetargetingefficiency somatic animals Callrenderthemresistant cells．Knockingout尸唧in bygenetargeting toPriondiseases．Weconstructedabovine vector transfectedthelinearizedvectorintothebovinefetalfibroblastsBFF P仰promoter-less BoPrPneo，then targedng