慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠TGF-β1及BMP-7蛋白的表达.pdfVIP

·80· 黑龙江医药科学2013年4月第36卷第2期 牛效清，张威，刘中柱，张浩 (佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯154003) 摘要：目的：研究慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠TGF一81及BMP一7蛋白的改变。为探讨防治肾间质纤维化 (RIF)的治疗机理提供参考依据和实验支持。方法：采用关木通免煎荆建立马兜铃酸肾病大鼠模型。将大鼠随机分为分两组， 检测肾脏病理、免疫组化法检测肾组织TGF—p1扣及BMP一7的表达，比较两组肾问质纤维化程度。结果：与空白对照组相 关。 关键词：马兜铃酸肾病；肾间质纤维化；TGF—p1；BMP一7 中图分类号：R692文献标识码：A文章编号：1008一0104(2013)02—0080一02 因服用含有马兜铃酸(aristoloehicacid，AA)的中草药然后通过统计学方法进行半定量分析。(3)肾脏组织病理分 而引起的肾损害。国外报道此病称为“中草药肾病”，国内学 析：HE和Masson染色石蜡组织切片。用百分比评分法对组 者将其称为“马兜铃酸肾病”(aristoloehic 织评估，计算30个高倍视野(×400，HPF)肾间质纤维化程 acidnephropathy， AAN)。急性AA病理表现为急性肾小管坏死。在我国以慢度半定量评估，分值为o～4分，0分：正常；1分：肾间质纤维 性AA最为多见，其病理损害大多数表现为进行性肾小管肾 化小于视野25％；2分：25％～49％；3分：50％～75％；4分： fibrosis，RIF)患者多在持 间质纤维化(renaltubulointerstitial 大于75％。计算随机30个肾皮质高倍视野(×400)，求和、取 续或间断小量服用含AA药物后出现症状，6个月后进入终 平均数，取得肾间质纤维化分值。形态学分析用盲法减少误 末期肾脏病，部分患者进展慢，10余年后才到达尿毒症期， 差。 1．6 停药后RIF并不能逆转。本研究以灌胃法制作慢性AAN模 统计学处理 型，通过对比分析空白对照组的TGF—B1和BMP一7的表 连续型变量服从正态分布，采用(；士s)；空白对照组与 达及肾问质纤维化的程度，以探讨慢性AAN致RIF的可能 CAAN组在不同时间点上的比较，采用独立样本t或t7检验。 作用机制，为临床防治慢性AAN提供依据。 1 材料与方法 SCr的相关性。所有数据采用SPssl8．0统计软件处理， 1．1 动物实验与分组 P0．05为差异有统计学意义。 清洁级健康雄性SD大鼠(大连医科大学实验动物中 2 结果 心)，30只，体重180～2209，7～8周龄。由大连动物实验中心 由表1可见。CAAN组中，肾组织中的BUN含量在4、 提供。自由进食饮水，适应性饲养5d。采用随机数字表法将 8、12周的表达均显著高于对照组(P0．05)。且随着时间 大鼠分为空白对照组、CAAN组。 的延长，肾组织中的BUN含量逐渐升高。由表2可见， 1．2 实验动物及主要试剂 关木通颗粒(由三九医药股份有限公司提供)；兔抗大鼠 著高于对照组(P0．05)。且随着时间的延长，肾组织中的 BMP一7、TGF—B1单抗、兔抗人FN抗体、兔抗鼠I型胶原 SCr含量逐渐升高。 抗体、兔抗鼠Ⅲ胶原抗体，以1：i00稀释免疫组化超敏SP试 表1 两组大鼠血清BUN表达比较(z士s) 剂盒。 1．3 模型制作及分组给药 制备CAAN模型(18只