用蛋白酶蛋白质工程技术改进洗涤剂用酶的进展.pdfVIP

蛋 酩 舒向峦}j牵蠢j，雪 维普资讯 H 用 化 学 工 业 1992年 用蛋 白酶蛋 白质工程技术改进 ， 洗涤剂用酶的进展 67 ／ r) 中国科技走学生物系 越雹堡 q、 ， - _ _ 一 一 嫡要 为适应洗涤莉用酶的迅速发展，本文综连丁用蛋白质王程的方法对SubtilJstn进行定向改造情况．先 后获得了县有挽氧化 高热稳定性 强耐碱性的突变体酶的改良菌种。 AbstraetThe specificimprovementofsubtil|sinby protein eng1necr wagreviewed for a~ tlnstherapiddeve]opmen~ofenzyme~usedfordetergent．Theimprovedstrainsofmuhmt ~zym~with entloxy enet~n，h h tl~ermostabIlt~y期d strcmgalkallfesIs惋nce呐 sobtained ． 早在1915年Rohm就发现蛋 白酶 有 助洗 性和热稳定性，以满足市场的需求。70年代 去污作用，但碱性蛋 白酶大规模应用于洗涤 的遗传工程和8O年代的蛋 白质工程的迅速发 剂工业还是最近三十多年的事 。由于加酶洗 展，特别是以枯草杆菌蛋白酶为模型的蛋白 涤剂具有洗涤时间短 去污能力强，除去血 质工程骄究已取得了令人瞩 目的成就 [s)， 污汗渍特别有效等特点，因而 自60年代由荷 已有可能为洗涤剂工业提供新型的蛋 白酶。 兰人首先试制成功以来，在西欧、美国、 日 l抗氧化性 本加酶洗涤剂得到了很大发展。据统计，在 当夸洗涤剂工业 中所甩的蛋 白酶几乎全 日本重垢型洗衣粉几乎全都是加酶产品，美 部是来源于芽胞杆菌的胞外碱性蛋 白酶 (Su- 国洗衣粉加酶的 占40 ，液体洗涤剂加酶的 btilisin，EC 3·4·21·14)[6]。 该酶对氧化剂 占60 。预计随着酶性能的改进，美国在 2 敏感(7)，在O．1M H 溶液中，2．5分钟后 —3年内加酶洗涤剂将 占80 。目前欧洲加 SubtilisinBPN 仅保留5O 的活 力(8)，这 酶洗涤剂 占90 [1)。我 国从1978年 开 始推 一 特性限制了Subtilisin在 漂 白洗涤剂中的 广使用加酶洗涤剂，1986年加酶洗涤剂 已上 应用。SubtilisinBPN 的活性 中 心 由组氨 升到洗涤剂总量 的15 }1989年我 国加酶洗 酸 一64，门冬氨酸一32及丝 氨 酸 一221构 涤齐4产量为15—20万吨[2，3)。洗 涤 剂工业 成 [9)，紧靠活性中心丝氨酸残 基 的是 甲硫 本身也在发展，漂白、消毒 洗 涤 剂 相继问 氨酸 ～222。SubtHis}nBPN 的氧化失括主 世。欧洲9O 的洗涤剂中加有漂白剂，美国 要是 甲硫氨酸 一222侧 链 氧 化 成 亚 砜的结 到9O年代漂 白洗 涤剂 将 占洗 涤荆 总量的 果[。)。1985年DavidA．Esteu(1l·l2)用盒式 20％， 日本 占总量的2O (1，4)，且 有 继续