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细胞分子生物学技术在中药研发中的应用 1徐蓓蕾1张贵君2逢美芳 (1北京中医药大学中药学院，北京100102，2即墨市食品药品监督管理局青岛) 中医药是祖国的文化瑰宝，对中华民族的繁衍生息做出了巨大的贡献。随着国家中医药现代 化战略的实施，运用现代科学技术来研发中药，尤其是在探究中药的作用机理及进行中药的质量 控制方面倍受关注。自20世纪50年代以来，细胞分子生物学技术就已成为了生物学的前沿和生 长点，引领着生命科学的发展。如今我们将其应用于中药领域，在保留中药整体宏观优势的同时， 更是从微观的角度对中药加以剖析，分子生物学的渗入将有利于我们祖国医药文化的不断进步与 发展完善，将有利于中药快速的跨入国际市场的大门。 1分子生物学技术在中药鉴定中的应用 1．1DNA分子遗传标记技术 DNA分子标记技术也称分子诊断技术，通过分析遗传物质的多态性来诊断生物体内的基因规律 及其外在性状的表现规律。其在近缘易混淆生药鉴定、药材道地性研究、中药质量标准化、中医药 古迹考证、药材种子种苗检测等方面都有较好的应用f11。DNA分子作为遗传信息的直接载体，具有 稳定性好，信息量大的特点，因此将其应用于中药材的鉴定中是非常有意义的，如日前兴起的RAPD 上讲，在实际应用中这些分子标记技术暂时还会受到一定的限制，但随着技术的不断进步，DNA分 子标记技术在中药鉴定中的应用必将日臻完善。 1．2电泳技术 所谓电泳技术就是带电粒子在电场中向着与其本身电荷相反的电极移动的过程，利用中药中 所含有的蛋白质带电荷的成分，在同一电场作用下，由于各组分所带电荷的性质、电荷数目以及 分子质量不同，其泳动的速度、方向不同，在一定时间内，各成分的泳动率不同，结合谱带数和 染色不同达到鉴定的目的，该方法具有快速、准确、稳定、专属性好的优剧11】。 1．3免疫技术 免疫技术相对于电泳技术来说，其更适用于动物类药材的鉴别，尤其是亲缘关系较近的动物 类药材。免疫技术可以应用于动物药材的鉴别原因在于不同种动物含有特异性蛋白，其表面带有 抗原抗体特异性结合的抗原决定簇，因此利用这种免疫特异性即可以将动物药的基原鉴定出来。 丁培贤等【121采用免疫电泳法和琼脂免疫扩散法准确地将多种动物的骨骼进行了鉴别，这说明免疫 鉴定法是一种高特异性的鉴别方法。 ．308． 2细胞分子生物学技术在中药作用机理中的应用 将细胞分子生物学技术应用于中药作用机理的探讨中，是中药领域的一个新的突破。目前，中 药之所以无法走出国门，主要原因在于其作用机理不明确。从分子水平阐明中药的作用机制，是我 们被国际认可的必经之路。有效药物究竟作用于哪一个受体、哪一个基因，对其作用究竟是上调还 是下调，这些都是我们值得探讨的。杜群等㈦探讨了溃结灵治疗uc的作用机理，对UC大鼠过量表 达的TLR2、TLT4mRNA有下调作用。癌症一直是人类关注的一个重大的主题，有研究认为中药抗 老是人类面l临的又一大主题，有研究表明，中药抗衰老是通过改善来年人的DNA修复能力及基因调 控以增强编码抗氧化酶的mRNA表达水平而实现的。如枸杞子、人参等都能够改善老年人核酸修复 能力，延缓衰老进程【1引。随着分子生物学的不断进步和发展，中药研究开发已经不仅仅是停留在中 医药基础理论的指导下，而是注入更多新鲜的血液，开辟了一个又一个全新的领域，去更好的诠释 我们祖国的医药文化。 3细胞分子生物学技术在中药代谢中的应用 药物进入人体后要经过吸收、分布、代谢、排泄的过程，进而发挥功效。那么研究代谢有关的 基因、酶、受体则成为中药研发领域不可缺少的一个部分。细胞色素P450(CYP450)是催化多种内、 外源性物包括甾体类化合物、药物、环境污染物和化学致癌物进行I相氧化代谢的重要酶系，主要分 家族在药物及内源物代谢中的作用尤为重要，据统计大约38个类别共150多种药物是CYP3A的底物， 约占全部药物的50％116I。 4细胞分子生物学技术在中药有效成分生产中的应用 很多中药有效成分已经成为了新药开发的一个新的研究方向，然而某些对于人类疾病非常重要 的有效成分的提取分离是非常困难的，能够提供该有效成分的中药资源非常有限，属于濒危物种， 比如紫杉醇。随着细胞分子生物学技术的不断渗入，组织细胞培养、毛状根诱导、基因调控等技术 的应用，使得这些问题有了一个新的突破口，也从另一个角度解决了资源的问题。组织培养起源与 19世纪30年代，以细胞全能性为理论，其优点为