- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
2.PCR的反应过程。 (1)变性:当温度上升到90 ℃以上时,双链DNA解聚为单链,如下图: 要点探究 (2)复性:温度下降到50 ℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,如下图: 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (3)延伸:温度上升到72 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,如下图: 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 特别提醒 (1)DNA分子复制的人工控制。 ①解开螺旋:在80~100 ℃时,DNA双螺旋打开,形成两条DNA单链,称为变性。 ②恢复螺旋:在50 ℃左右时,两条DNA单链重新形成双螺旋结构,称为复性。 ③复制条件:缓冲液、DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶和两种引物。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 ④反应场所:PCR仪。 (2)PCR技术中的引物: ①含义:引物是一小段单链DNA或RNA分子。 ②作用:为DNA聚合酶提供合成的3′端起点。 ③种类:扩增一个DNA分子需要2种引物。 ④数目:引物数目等于新合成的DNA子链数目。 ⑤与DNA母链的关系:两种引物分别与DNA母链的3′端通过碱基互补配对结合。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 【例?】多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历三十多次下述循环:95 ℃条件下使模板DNA变性、解链→55 ℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述,不正确的是( ) A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现 B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸 D.PCR与细胞内DNA复制相比,其所需要酶的最适温度较高 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 解析:PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延伸。DNA变性(90~95 ℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。复性(55~65 ℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。延伸(70~75 ℃):在Taq酶(在72 ℃左右活性最高)的作用下,以四种脱氧核苷酸为原料,从引物的5′端向3′端延伸,合成与模板链互补的DNA链。 答案:C 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 考点3 血红蛋白的提取与分离 要点探究 1.常用的蛋白质分离方法。 (1)凝胶色谱法。 后流出 先流出 洗脱次序 较长 较短 经过路程 垂直向下和无规则扩散运动 垂直向下 运动方式 能进入 不能进入 凝胶内部 相对分子质量小 相对分子质量大 蛋白质 项目 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (2)电泳法原理。 ①在一定pH下,蛋白质分子的某些基团解离后带上正电或负电。在电场的作用下,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 ②由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 2.分离DNA、PCR技术、分离蛋白质的比较。 要点探究 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 解决了DNA研究中材料不足的问题 为DNA研究打下基础 实验意义 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 获得大量DNA 获得较纯净的DNA 实验结果 样品处理→凝胶色谱操作 变性→复性→延伸 选取材料→破碎细胞释放DNA→除杂→DNA析出与鉴定 实验过程 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 利用DNA热变性原理体外扩增DNA DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精 实验原理 分离蛋白质 PCR技术 分离DNA 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 3.(1)从所用载体上看。 ①琼脂糖凝胶电泳用的载体是琼脂糖凝胶。 ②SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳用的载体是SDS—聚丙烯酰胺凝胶。 (2)从分离原理上看。 ①琼脂糖凝胶电泳利用了蛋白质分子带电性质和分子大小等多方面的差异。 ②SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳仅利用了组成蛋白质的多肽链的相对分子质量的大小的差异。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 (3)从方法优点上看。 ①琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需处理,电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。 ②SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中SDS消除了净电荷对迁移率的
您可能关注的文档
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:9-专题研究3 定值、定点与存在性问题.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:10-1算法与程序框图.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:10-3古典概型.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:10-4几何概型.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:10-5随机抽样.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:10-6用样本估计总体.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:10-7线性回归分析与统计案例.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:选修4-4-1坐标系.ppt
- 新人教版2016届高三数学一轮复习课件:选修4-4-2参数方程.ppt
- 新人教版2016届高考生物一轮复习课件:学案12 光合作用和细胞呼吸的综合.ppt
- 新人教版2016届高考生物一轮复习课件:学案42 基因工程.ppt
- 新人教版2016届高考生物一轮复习课件:学案43 细胞工程.ppt
- 新人教版2016届高考生物一轮复习课件:学案44 胚胎工程.ppt
- 新人教版2016届高考生物一轮复习课件:学案45 生物技术的安全性和伦理问题.ppt
- 新人教版2016届高考生物一轮复习课件:学案46 生 态 工 程.ppt
- 新人教版2016届高考数学理科一轮复习课件:1-1集合的概念与运算.ppt
- 新人教版2016届高考数学理科一轮复习课件:1-2命题及其关系、充分条件与必要条件.ppt
- 新人教版2016届高考数学理科一轮复习课件:1-3简单的逻辑联结词、全称量词与存在量词.ppt
- 新人教版2016届高考数学理科一轮复习课件:2-1函数及其表示.ppt
- 新人教版2016届高考数学理科一轮复习课件:2-2函数的单调性与最大(小)值.ppt
文档评论(0)