乌药精颗粒中粗多糖的检测方法探讨——广州牌牌生物.pdfVIP

【中药研究】 乌药精颗粒中粗多糖的检测方法探讨 戴关海吴人照童晔玲杨 锋陈字 浙江省中医药研究院 浙江杭州310007 关键词乌药精颗粒粗多糖检测方法 多糖在调节血脂、免疫功能及抗疲劳、抗肿瘤、 2．2样品处理和测定：①准确称取混合均匀的样品 抗放射等方面具有显著的作用[1引。目前国内尚无标 准方法测定多糖的含量[4]，本法采用糖化酶消化， 水浴中加热2小时，冷却至室温，过滤。加1．0ml 80％乙醇沉淀，用苯酚一硫酸反应法测定含量。测定 结果稳定、准确，适用于含糊精保健食品中粗多糖含 量的检测。 1 实验材料 保温2h，中间间歇搅拌，加热至沸(使酶失活)。放 1．1 实验试剂：①葡萄糖标准液：准确称取105℃干 燥恒重的葡萄糖标准品0．50009，加水溶解后，定容离心管中，加20ml无水乙醇，在离心机中以 至50ml，此液含葡萄糖10．00mg／ml。②葡萄糖标准 应用液：吸取以上标准液1．0ml，加水定容至100ml， 此液含葡萄糖0．10mg／ml。③509／L苯酚溶液：称取 新鲜苯酚5．Og，加水至100ml溶解，放置冰箱中。④ 糖化酶：2509／瓶，活性10万／g，批号：080318，上 海蓝季科技发展有限公司生产；⑤乌药精颗粒：由天 台乌药、西洋参、黄精、刺五加等组成，为棕黄色粉 末，样品批号分别为071210、071215、071220。1号液中葡萄糖含量。④同时做糊精对照(样品由糊精、 样品(上述中药提取物干燥粉末0．79，葡萄糖葡萄糖各19组成)，如果糊精对照测定结果，粗多糖 1．39)；2号样品(与乌药精颗粒配方相同，含中药提含量不在0．2oA以下，说明酶活性不够，应增加用量 取物干燥粉末0．79，糊精0．99，葡萄糖0．49)；3号重新检测。 2．3 X 样品(含糊精、葡萄糖各lg)。由浙江天台山乌药生 结果计算：X(％)一ITI】×v】×v3lOO／(m2 物T程有限公司提供。 1．2 主要仪器：UV一1000型紫外可见分光光度计， 上海天美科学仪器有限公司生产；DK一600S型三用恒 MS3 温水箱，上海精宏实验设备有限公司生产；IKA V。为样品定容体积(m1)；V。为用于醇沉的体积 型漩涡混合器，广州仪科实验室技术有限公司生产； G孓6R型离心机，贝克曼公司生产。 定用所取样品测定液的体积(m1)。 2 实验方法 2．4粗多糖测定方法验证：取1号样品、2号样品、 2．1 标准曲线制备：准确量取葡萄糖标准应用液 3号样品各29，分别用上述粗多糖检验方法测定样品 0．0、0．1、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0ml(相当于葡粗多糖含量，同时用不加酶方法测定样品粗多糖 萄糖0．0、0．01、0．02、0．04、0．06、0．08、含量。 3 0．10mg)，分别置于25ml比色管，准确加水至2ml，实验结果 3．1 加入苯酚溶液1．0ml，浓硫酸10ml，混匀，沸水浴 不同批次乌药精颗粒粗多糖检测结果：采用上 2min，冷却至室温，485nm处1cm比色皿测定吸光 度，绘制标准曲线。 精颗粒样品进行了粗多糖含量检测，结果详见表1。 万方数据 浙江中医杂志2010年3月第45卷第3期 ·219· 表1 不同批次乌药精颗粒粗多糖含量 样品批号 粗多糖含量(mg／1009) 海藻玉壶汤治疗盆腔囊性病变117例 l O 895．5 1 5 900．5 丁淑