第九章抗生素.ppt

庆大霉素的发酵工艺 2.工艺要点 （2）培养基 C源：淀粉、玉米粉、葡萄糖。 N源：黄豆饼粉、蛋白胨、鱼粉（尚含浓P， 能促进菌丝分裂）、硫酸铵。 无机盐：硝酸钾，有利于细胞膜的渗透。 碳酸钙，缓冲pH。 氯化钴，激发酶的活力，提高发酵 单位。 消泡剂：泡敌：消泡力强，但有毒，要控制 用量。 豆油：由于成本高，不用。 庆大霉素的发酵工艺 2.工艺要点 （3）发酵：庆大霉素生产采用三级发酵形式。 发酵方式属间歇发酵，有别于连续发酵。其特点是在一个发酵罐内完成生长、生产期。全部过程在一个发酵罐内进行，技术较成熟，但设备利用率低。 庆大霉素的发酵工艺 2.工艺要点 （3）发酵：庆大霉素生产采用三级发酵形式。 发酵温度，种子培养阶段控制在35～36℃，发酵阶段控制在32～34℃。发酵周期为5～6天。 生长的最适pH为6.8～7.5，产物合成的最适pH为7.0～7.4。庆大霉素的生产菌种耗氧量较大，发酵生产中需保持良好的通气和搅拌。 发酵终点为菌丝自溶、发酵液发泡、pH上升、C源残存量为零。 四环素生产工艺 发酵工艺 培养基配制 1、孢子培养基（g/L） 小麦麸皮 35 琼脂 20 MgSO4 0.1 KH2PO4 0.2 (NH4)2HPO4 0.3 蒸馏水 pH自然 2、种子培养基（g/L） 黄豆饼粉 20 淀粉 40 酵母粉 5 蛋白胨 5 MgSO4 0.25 KH2PO4 0.2 (NH4)2SO4 3 CaCO3 4 3、发酵培养基（g/L） 黄豆饼粉 40 淀粉 100 酵母粉 2.5 蛋白胨 15 MgSO4 0.25 CaCO3 4 (NH4)2SO4 3 a-淀粉酶（105U/mL） 0.1mL 孢子制备 1、接种 无菌条件，接种斜面。 2、培养 将接种后的试管放入恒温箱 内，37℃培养5d。 种子制备 液体培养法（三角瓶摇床振荡或转式培养） 接种发酵罐发酵 1、温度控制 32℃ 160-180h（变温发酵） 2、pH值控制 7-8 （1）调整培养基的组分 在培养基配方中考虑到维持pH的需要。例如加入CaCO3，使用缓冲液等。 （2）在发酵过程中进行控制 ①添加CaCO3 ②氨水流加法 ③尿素流加法 （3）通过补料调pH （4）当补料与调pH发生矛盾时，加酸碱调pH 四环素提炼 土霉素生产工艺 龟裂霉菌生长比较缓慢，对其进行一级 发酵培养的目的是使孢子发芽，长出菌丝，也 叫做发芽罐。 接种：实罐灭菌完成后，先冷却一 段时间，至温度在20—30摄氏度时进 行接种。首先用消毒剂对接种口及其 周围进行擦拭，多次擦拭完后，再用 酒精棉球进行多次擦拭。完成后，酒 精棉球放在接种口周围，用火柴点 燃，并迅速将种子注射进罐内。注射 完后，迅速用白蜡封口再用医用胶布 密封，最后用小易拉罐罩住接种口。 保温：一级发酵时，温度应保持在 30—31摄氏度，但实际罐温时高时 低，变化多端。因此一级发酵利用夹 套换热来保持温度恒定，其中冷却水 和蒸汽都有两个管道进入混合器：一 种是气动隔膜阀，用于自动调节冷却 水和蒸汽通量；一种是手动阀门。 检测：一级发酵大约需要27—28小 时左右的发酵时间，在此期间要每两 小时取样一次，检测菌体密度以及是 否染菌。注意：取样口通常是用盛有 甲醛的小罐封口的，其原因是防止杂 菌有取样口进入发酵罐内。 二级种子培养 二级种子罐同样采用实罐灭菌的方式，对罐体和