鲜地黄标准提取物的制备及质量标准研究.pdfVIP

地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosaLiboseh．的新鲜或干燥块根【l】。目前，在我国十多个省区如河南、 山东、河北、辽宁、陕西、山西、内蒙古、湖南、湖北、江苏、浙江、四川等地都有栽培。道地药材怀地黄因 其个大、质优而闻名，主产于河南温县、武陟、沁阳、孟县、修武等地，也是著名的“四大怀药”之一。根据 药效的差异，地黄分为鲜地黄、生地黄和熟地黄，均有滋阴生津的功效，但各有侧重f21。鲜地黄多用于瘟病伤 阴、高热烦渴、吐血、衄血等症，清热生津、止血之功效均胜于生地黄，而熟地黄功效为补肾滋阴。地黄在中 成药中应用广泛，如六味地黄丸、知柏地黄丸、杞菊地黄丸、舒唐络胶囊等等【3】。为了获得品质良好、疗效保 障的原料药，保证中成药生产原料用药的质量均一性，迫切需要可以体现原药材特定的中医功效、具有相对明 确物质基础、质量可控的提取物，为地黄药材深入研究及地黄复方制剂开发提高奠定基础。 建立鲜地黄提取物质量控制标准用于其质量评价是目前亟待解决的问题。关于地黄药材的质量控制长期以 来多停留在性状和薄层鉴别上，近年文献报道地黄中环烯醚萜类成分的含量测定，都仅限于梓醇的含量测定。 12批次怀庆府(今焦作地区)产鲜地黄提取物进行定性鉴别和定量测定。其中通过外标法一点法，测定了梓醇、 地黄苷D、益母草苷的含量，反映各产地怀地黄鲜品药材的内在质量差异，可为其质量控制提供有价值的参考， 为不同产区及品种怀地黄药材质量评价提供依据。 1实验材料 1．1仪器与试药 美国Waters2695高效液相色谱仪，Waters 型电子分析天平，上海友声衡器有限公司；万分之一分析天平，日本岛津；RE-5299型旋转蒸发器，郑州凯鹏 实验仪器有限公司；SHZ-D(Ⅲ)型循环水式多用真空泵，巩义市英峪仪器厂；低温冷却循环泵，郑州凯鹏实 验仪器有限公司；电热恒温水浴锅，北京市永光明医疗仪器厂；KT-350W超声波清洗器，济宁科特超声电子有 有限公司：乙腈为色谱纯，由天津市四友精细化学品有限公司生产；水为重蒸馏水：其他试剂均为分析纯。 1．2样品来源 鲜地黄药材为产于河南焦作温县、武陟的怀地黄，样品经河南省中医药研究院李更生研究员鉴定为 Rehmannia ct Libosch．￡huechingensis(Chaoscbis)Hsiao，见表1。 glutinosa 表1鲜地黄药材样品来源 92 2方法与结果 2．1地黄标准提取物制备方法 输出功率为300W)，取提取液过滤．合并。取提取液链真空薄膜燕艇仪中减Jh卫】收己时，并浓缩罕通最。 2 1．2纯化 大孔吸附树脂的预处理 取HP20型的大扎树脂．用蒸馏水浸泡段时问，使N充分溶胀，湿泣装杆． 先用4倍树脂体秘的lmol／L盐睦溶液浸泡3 氧化钠溶液浸泡3h除去酸性杂质，抖朋已群洗涤树脂．至洗涤液加水币变沣浊为ll(即尢醇咏)『4”。 大孔吸附树脂纯化取鲜地黄提取浓缩液jJi 袭，弃上水液．再Ⅲ埘倍枉体秘20％已孵冼脱，台井20％已醇洗脱液，减压浓缩至h得鲜地黄提取物。 2．2定性鉴别 5)为腱开荆，艟丌， 吸取上述两种溶液荐29L．分别点1川6E胶G薄层板h以氯甲烷．甲孵．水(6：4：O 取出．晾干，喷以香草醛．浓硫酸试泄．在105℃加热军斑点口色清晰。供试品色带中．住‘，对照晶色谱相应的 似置h．显相『口颜色的斑点。见罔I． 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 圈1 12批鲜地黄捱取物lk0色谱闰 ～12鲜地黄提取物样晶13梓醇】4地黄苷DI 5艋母草苷 2．3鲜地黄提取物含量测定方法研究 u 2．3．1色谱条件色谱条件：InertsilODS．SP柱(5 ml／min。 nlIl，柱温为35℃，流量l 醇对照品溶液。取地黄苷D对照品适量，精密称定，加流动相制成每lml含0．203mg的溶液，即得地黄苷 D对照品溶液。取益母草苷对照品适量，