Ghrelin 预处理对 H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的影响.pdf

·1058 · 安徽医科大学学报　 Acta Universitatis MedicinalisAnhui　 2015 Aug;50(8) Ghrelin预处理对 H9C2心肌细胞缺氧/ 复氧损伤的影响 1 1 2 1 陈莹莹 ,吴继雄 ,王　 靓 ,何　 非 摘要　 目的　 探讨 Ghrelin 预处理对 H9C2 心肌细胞缺氧/ lin是1999年首次从胃组织中发现,由28个氨基酸 复氧损伤的影响。 方法　 培养 H9C2 心肌细胞并建立心肌 组成的脑肠肽,是生长激素促分泌素受体(growth 细胞缺氧(21h)/ 复氧(6 h)模型。 细胞随机分成4组:对照 secretagogue receptor, GHS [2] R) 的内源性配体 。 组,缺氧/ 复氧组(H/ R组),缺氧/ 复氧+Ghrelin组 (H/ R+ GHSR属于G蛋白偶联受体家族,以两种亚型的形 G组),缺氧/ 复氧+Ghrelin +生长激素促分泌素受体(GH- 式存在,即 GHS-R1a 和 GHS-R1b。 Ghrelin 及其受 SR)-siRNA组(H/ R+G+G-siRNA组);采用 siRNA 干扰技 体GHSR存在于许多器官和组织中,Ghrelin通过与 术阻断Ghrelin受体 GHSR 的表达以及 Hoechst 33258 染色 GHSR结合参与了食欲、能量、体重的调节,糖和脂 剂和流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot 法检测 肪的代谢,胃肠、心血管和免疫功能的调节以及细胞 各组凋亡相关蛋白表达情况。 结果　 GHSR 存在于正常 H9C2心肌细胞中,GHSR-siRNA可以显著抑制H9C2心肌细 的增殖和凋亡等诸多生理作用,并且可以通过 siR- 胞中GHSR的表达。 与H/ R组相比,在H/ R+G组中缺氧/ NA干扰阻断GHSR 的表达,从而影响Ghrelin各项 复氧损伤所导致心肌细胞的凋亡率明显下降(P 0．05),B 生理作用的发挥[3-4]。 Ghrelin 及其受体在人的心 [5] 淋巴细胞瘤-2 蛋白/ Bcl-2 相关 X 蛋白(Bcl-2/ Bax)比率明 脏和血管中都有表达 。 在心血管系统中,Ghrelin 显上调(P 0．05),含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 可以增加心肌收缩力,改善由心肌梗死引起的心脏 (caspase-3)表达水平被显著抑制(P0．05)。 而与H/ R+G 衰竭,并且这种心脏保护作用的发挥不依赖于生长 组相比,H/ R+G +G-siRNA 组心肌细胞凋亡率增加(P [6] 激素的释放 。 该研究利用H9C2心肌细胞株建立 0．05),Bcl-2/ Bax 比率显著下降(P 0．05),caspase-3 表达 心肌细胞缺氧/ 复氧模型,模拟心肌细胞的缺血再灌 上调(P0．05)。 结论　 Ghrelin具有减轻缺氧/ 复氧所引起 注,同时运用 siRNA 技术阻断 GHSR 的表达,观察 的心肌细胞损伤、抑制心肌细胞凋亡的作用。 各实验组心肌细胞凋亡率以及凋亡相关蛋白的表达 关键词　 H9C2细胞株;缺氧/ 复氧损伤;Ghrelin;凋亡 情况,研究Ghrelin预处理对缺氧复氧心肌细胞的保 中图分类号　 R322