Q-Sepharose FF色谱分离制备鸡蛋卵白蛋白的研究.pdf

力 西北大学学报(自然科学版) 2008年8月，第38卷第4期，Aug．，2008，V01．38，No．4 JournalofNorthwest Science 矽 University(NaturalEdition) r llqwu FF色谱分离制备鸡蛋卵白蛋白的研究 Q—Sepharose 王毕妮1，徐明生2，杜华英2 ， (1．西北大学化-E学院，陕西西安710069；2．江西农业大学食品科学与工程学院，江西南昌330045) FF色谱法分离鸡蛋清 摘要：目的研究鸡蛋卵白蛋白的分离工艺条件。方法采用Q—Sepharose cm×20 中的卵白蛋白，并用电泳和RP．HPLC色谱法测定其纯度。结果在40mL色谱柱(毗．0 cm)中，蛋清(蛋白质含量为27．5mg／mL)进样量为140mL时，色谱柱对卵白蛋白的吸附量达到饱 mol／L 和；用含0．15 NaCl的瞄s．HCl(pH8．O)洗脱液洗脱，获得的鸡蛋卵白蛋白的纯度达92％。 FF色谱法分离鸡蛋卵白蛋白，整个工艺路线简便、快捷、成本低、效率高， 结论采用Q．Sepharose 适宜于工业生产应用。 关键词：卵白蛋白；离子交换色谱法；分离制备；蛋清 中图分类号：S879．3文献标识码：A 文章编号：1000-274X(2008)04旬587旬6 卵白蛋白是鸡蛋清中的主要蛋白质，具有良好 Fast pH不小于8．O)；QSepharose 的加工性能及生物学特性，广泛应用于食品加工及 公司)；卵白蛋白Ova 科学研究。现代研究表明，卵白蛋白酶解物具有一 400—97 定生物活性。Fujita将卵白蛋白用胃蛋白酶水解3分子量标准蛋白MARKl4 000(97．4×105 h，用RP—HPLC分离出具有血管舒张活性的物质 OA358—365…。在胰凝乳蛋白酶酶解物中也分离出 x 肌动蛋白，31．0×103牛碳酸酐酶，20．1103胰蛋白 Ovokinin(2～7)和OA359—364，这两种肽对自发性 酶抑制剂和14．4×103鸡蛋清溶菌酶，上海生物化 高血压大鼠具有降压作用口J。．Davalos和Mingsheng 学研究所)。 等研究发现卵白蛋白酶解物是具有强抗氧化活性的 1．2主要仪器设备 多肽”’4J。从蛋清中分离制备卵白蛋白的方法有盐 色谱工作站(HW-2000千谱软件有限公司)；自 析法¨』、有机溶剂沉淀法和液相色谱法【6j。盐析法 动部分收集器(BS一100A上海沪西仪器厂)；紫外检 虽然可以生产大量的卵白蛋白，但获得的卵白蛋白 测仪(HD-21-88上海沪西仪器厂)；高效液相色谱仪 含有较高的盐类，需经过反复结晶才能得到高纯度 (Breeze 的卵白蛋白。盐析法与有机溶剂沉淀法会造成卵白 紫外可见分光光度计(754型上海光谱仪器有限公 蛋白的变性。液相