低聚壳聚糖降解制备、分离、纯化、鉴别的研究进展.pdfVIP

·82· 高 分 子 通 报 2006年10月 低聚壳聚糖降解制备、分离、纯化、鉴别的研究进展 冯小强1，杨 声孙，苏中兴1，李会学2，赵海红2 (1．兰州大学化学化工学院，兰州730000；2．天水师范学院生命与化学学院，天水741001) 摘要：查阅了近十年来国1勾#1-有关壳聚糖降解的最新文献，系统地综述了壳聚糖降解制备、分离、纯化、鉴 别的研究进展。 关键词：壳聚糖；降解；制备‘；分离；纯化；鉴别 但由于其分子量大、水溶性差、在人体内不易被吸收而使其应用受到限制心o。随着研究的深入，人们发现 壳聚糖经水解生成的低聚合度的葡胺糖具有较高的溶解度、易被吸收利用，更显示其独特的生理活性和 功能性质，具有更有魅力的新用途。同壳聚糖大分子相比，低聚壳聚糖糖具有：(1)水溶性：当壳聚糖降 解时，其相对分子质量降低，壳聚糖分子中的氢键作用随之减弱，使壳聚糖分子在溶液中具有更大的扩展 趋势，从而引起壳聚糖分子构象发生一定的变化。而链长度和分子构象的变化使得壳聚糖在水溶液中的 无序程度增加，从而使其水溶性大为改善；(2)吸湿保湿性：低聚壳聚糖分子中大量的一NH，和一OH强极 性基团的存在，不仅使低聚壳聚糖的水溶性大为改善，也使其具有良好的吸湿保湿功能；(3)抗菌抑菌功 能：有试验证明壳聚糖的抑菌作用是随着壳聚糖相对分子质量的降低而逐渐增强的，尤以相对分子质量 为1500左右的低聚壳聚糖的抗菌效果最好∞1。特别是相对分子质量低于一万的低聚壳聚糖更展现出独 特的优良生理活性和功能性质，即在人体肠道内活化增殖双歧杆菌，提高巨噬细胞的吞噬能力，促进脾脏 抗体生长，抑制肿瘤细胞生长：降低血压、血糖、血脂、吸附胆固醇。在微环境中具有较强抑菌作用和显著 的保温吸湿能力等；特别是较高聚合度低聚壳聚糖具有阻碍病原菌生长和繁殖的功能，能促进蛋白质合 成；活化植物细胞，从而促进植物快速生长等H1。 1 低聚壳聚糖降解制备方法 目前，低聚水溶性壳聚糖的降解方法主要有酶降解法，化学降解及物理降解三种。另外，最近还发展 了联合降解法。 1．1酶降解 在壳聚糖降解工艺中，酶法降解与物理、化学降解方法相比具有许多优点¨o。酶法降解过程和降解 产物的相对分子质量更容易被控制，而且，酶法降解在较温和条件下进行，可选择性地切断口一1，4糖苷 键，反应过程中不需要大量的反应试剂，对环境污染较小等。目前，已发现有三十多种专一或非专一性酶 可用于壳聚糖的降解，从而生成各种相对分子质量的低聚壳聚糖。这些酶包括专一性降解酶如壳聚糖 酶，非专一性酶如脂肪酶、溶菌酶、蛋白酶、元酶和聚糖酶等¨1。壳聚糖酶是壳聚糖的专一性水解酶，主 要来源于真菌。壳聚糖酶催化壳聚糖降解得到甲壳低聚糖，其最适宜的pH值为4．0～6．8，产物是聚合度 的甲壳低聚糖。自然界中的壳聚糖绝大部分由壳聚糖酶催化水解成小分子，但是商品壳聚糖酶的价格昂 贵，不易得到。近年来研究发现许多种酶如蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、葡萄糖酶和胰酶等对壳聚糖具有非 基金项目：天水师范学院科学研究基金资助项目(X3一01)； 作者简介：冯小强(1980一)，男，现为兰州大学化学化工学院在读硕士研究生，主要研究方向为电分析化学； *通讯联系人。杨声(1964一)。男，教授，主要从事电分析化学研究工作，E-mail：ysh@mail．tsnc．edu．en． 万方数据 第10期 高 分 子 通 报 · 83· 专一性水解作用，也可用来催化水解壳聚糖得到低相对分子质量产品[7】。因此，寻求经济，高效的壳聚糖 非专一性水解酶就成了近年来研究的热点。陈江燕等[83研究了纤维素酶对壳聚糖的降解作用并初步探 讨了壳聚糖水解反应的动力学，得到的水解产物有氨基葡萄糖和它的二糖、三糖和四糖，说明纤维素酶 能有效地催化壳聚糖降解。陈云，胡健等∽o采用粘度测定法和还原糖测定法，研究了温度、pH值、反应时 间、底物浓度、金属离子及壳聚糖的脱乙酰度对胃蛋白酶降解活性的影响，研究了胃蛋白酶催化降解壳聚 糖的特性。华南理工大学张立彦等¨刮选用溶菌酶作为壳聚糖的水解用酶，研究了壳聚糖的脱乙酰度、温 度、pH、酶解时间、底物浓度、酶浓度及摇床速率等对酶水解反应的影响，并对以上影响因素进行优化，得 出了制备低聚壳聚糖的最佳生产工艺。武汉大学李艾华，杜予民等u1o还做了曲霉AH625降解制备低聚 壳聚