化学-海因酶法制备光学纯D-茶氨酸.pdfVIP

978 化学试剂 2011年11月 化学-海因酶法制备光学纯D-茶氨酸 张芙蓉，周佳栋，曹飞‘，王月霞，黄荣醒，王婧 (南京工业大学生物与制药工程学院，江苏南京210009) 摘要：建立了化学-海因酶法制备光学纯D．茶氨酸的新方法。采用氰酸盐和￡-谷氨酸关环制备D．￡-羧乙基海因，与乙胺 进行侧链衍生后得到酶转化底物^，·乙基海因丙酰胺；进而采用D-海因酶催化水解得到N一氨甲酰-D·茶氨酸，经亚硝酸水 解最终得到标题化合物。总收率达55％。对海因酶催化和亚硝酸水解过程条件进行了优化。 关键词：D．茶氨酸；D．海因酶；化学-海因酶法 中图分类号：TQ028．8文献标识码：A 文章编号：0258·3283(2011)11-0978-03 l ￡-茶氨酸具有改善食品风味H]、降血压雌o、增 实验部分 强抗癌药物疗效H】、提高免疫力【4]、松弛神经紧 1．1 主要仪器与试剂 张‘等作用，在食品、保健品、医药等行业具有广 泛的应用M7】。目前，L．茶氨酸的合成方法已有大 量研究和报道‘“10。，而D-茶氨酸的研究却很少。ner Sys- 特别是对于在化学合成过程中产生的D-茶氨酸 转化反应过程检测条件：C。。色谱柱，y(水)：y(乙 对人体的影响目前尚无报道，因此，开发一种制备 腈)=50：50，流量0．7mL／min，柱温25口C，波长 D-茶氨酸的方法对于工．茶氨酸的质量控制具有 220 nm。 重要意义。 Burkholderic 1003菌株由本校微生物 cepecia 海因酶是一类催化海因、5．单替代海因及其 实验室提供；￡．谷氨酸(生物试剂，上海源聚生物 衍生物的环酰胺键断裂水解酶…o，作为一类重 科技有限公司)；N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC。 要的工业酶制剂，其酶解产物可以经化学方法 99％，吉尔生化(上海)有限公司)；1-羟基苯并三 或氨甲酰水解酶水解生产具光学活性的D-和L- 氮唑(HOBT，99％，吉尔生化(上海)有限公司)； 型氨基酸而被广泛应用，特别是在万吨级产 乙胺盐酸盐(分析纯，国药集团化学试剂有限公 品——D一对羟基苯甘氨酸的生产上具有重要的 司)；J7、r一甲基吗啉(化学纯，国药集团化学试剂有 用途¨21。本文建立了一条化学法制备D，L-羧限公司)；其余试剂均为国产分析纯。 乙基海因与乙胺进行侧链衍生后得到酶转化底 1．2 实验方法 物J『＼，-乙基海因丙酰胺；进而采用D一海因酶催化 1．2．1 D，L．羧乙基海因(1)的制备 水解得到Ⅳ-氨甲酰．D．茶氨酸，经亚硝酸水解最 采用关环法制备D，L-羧乙基海因，具体制备