TDP-25对运动神经元延迟整流钾电流电生理特性影响与双甲氧姜黄素保护作用.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………．．1 英文摘要………………………………………………………………．4 研究论文TDP．25对运动神经元延迟整流钾电流的电生理特性的影响及 双甲氧姜黄素的保护作用 —1L—j_． 日lJ舌………………………………………………………………7 材料与方法…………………．……………………………………8 结果………………………………………………………………12 附图………………………………………………………………16 讨论………………………………………………………………21 结论………………………………………………………………．24 参考文献…………………………………．．……………………．24 综述 电压门控钾通道生物、药理学特性及其相关神经系统疾病……28 致谢…………………………………………………………………………．43 个人简历………………………………………………………………．44 中文摘要 TDP．25对运动神经元延迟整流钾电流电生理特性的 影响及双甲氧姜黄素的保护作用 摘 要 Lateral 肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic 进展的、具有严重致死性的神经变性疾病，以进行性运动神经元丢失为特 DNA of43 征，发病机制不明。TDP一43(TAR kDa)被认 bingdingprotein lateral 为是在肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic 呆患者大脑中发现的泛素化包涵体的主要成分，主要功能为参与特定的前 mRNA的剪接、转录、维持其稳定性及微小mRNA的生物合成。目前在 TDP．43的功能异常及神经变性病之间的直接联系提供了强有力的证据。 对运动神经元具有毒性作用，引起神经元变性，在疾病的发病过程中起重 要作用，但其机制尚未明确。最初的观点认为：兴奋性毒性可以引起运动 神经元损伤。然而，对ALS患者的神经传导的研究发现，轴索膜兴奋性 的提高，及过兴奋性的程度与病人的生存期呈负相关。兴奋性的提高包括 持续性钠电流的增加及钾电流的减小。然而对TDP．43模型是否存在高兴 奋性尚不清楚。随着对ALS研究的不断深入及对K+通道的进一步了解， rectifier ALS与钾通道的关系日益受到人们的关注，延迟整流电流(delayed potassium 关ALS模型细胞水平上对钾电流的研究甚少。同时，双甲氧姜黄素 (Dimethoxy 化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等功效而受了广泛关注，本实验室研究也发 现其对转染TDP．43的运动神经元样细胞线粒体有保护作用，可以增强其 自噬清除毒性蛋白的能力，此外姜黄素还可以上调Nrf2和II相酶的水平， 减少氧化应激产生的损害，进而保护细胞。 目的：检测在稳定转染TDP．25基因的运动神经元的延迟整流钾电流 性质是否发生改变及动作电位相关指标的改变，以探讨TDP一25对运动神 中文摘要 经元产生毒性作用的机制；进一步探讨DMC对电压门控钾通的道调节作 用。 vector)的两种 方法：应用稳定转染TDP．25基因和空质粒(Empty 细胞，该细胞系由本实验室构建，参考NSC34细胞株的培养方法进行培 养，采用抗生素加压的方法筛选单克隆细胞，将筛选所得单克隆细胞系进 行培养、传代。在全细胞膜片钳技术电压钳模式下记录上述两种细胞延迟