球形孢子丝菌DNA提取方法的比较.pdfVIP

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球形孢子丝菌DNA提取方法的比较.pdf

·216· ·论著· 球形孢子丝菌DNA提取方法的比较 石滢 崔岩 赵莉佩 宋洋 李珊山 (吉林大学第一医院皮肤性病科,长春130021) 【摘要】 目的获得一种高效、快速、简便的提取球形孢子丝菌DNA的方法。方法以不同地区来源的球形孢子丝菌为 实验材料,采用CTAB法、异硫氰酸胍法、试剂盒法、碱裂解法4种方法分别提取球形孢子丝菌DNA。通过紫外吸光度法测 定DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增评价DNA的质量。结果虽然不同方法均可得到球形孢子丝菌的 样本均出现阳性条带,且条带亮度较好。结论碱裂解法是获得高质量球形孢子丝菌DNA的理想方法。 【关键词】 球形孢子丝菌;碱裂解法;CTAB法;异硫氰酸胍法;DNA提取 379.9 【中图分类号】R 【文献标识码】A 【文章编号】 1673-3827(2015)10—0216-04 ofDNAextractionmethodsfrom Comparison Sporothrixglobosa SHI Shan·shan Ying,CUIYah,ZHAO Yang,LI Li—pei,SONG and 130021,China) (DepartmentofDermatologyVenereology,FirstHospitalofJilinUniversity,Changchun Tofinda and DNAextractionfrom 【Abstract】0bjectiverapid,effectiveeasy-to·perform protocolSporothrixglobosa.Methods Four as extraction methods,suchCTAB-extraction,guanidinethiocyanateboiling-extraction,alkalinelysis·extraction,DNAkit,were basedon isolatesfromdifferent and oftheDNAweredeterminedultraviolet eompared Sporothrixglobosa regions.Thepurityyield by DNA wasevaluatedwith andPCR Itshowedthat absorptionspectrum.Thequality agarosegelelectrophoresisamplification.Resdts allmethodscould alkaline wasbetterthanothersforthe and oftheDNA.Basedon getDNA,but lysis-extraction purityyield degener- ated of ofthecalmodulinfor foundall showed Alkaline fragments PCR,we primem genes samples brightstripe.Conclusionslysis— extractionisthemostsuitablemethodfor DNAfrom extractinghighquality Sporothrixglobosa. extration 【Keywords】Sporot

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