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球形孢子丝菌DNA提取方法的比较.pdf
·216·
·论著·
球形孢子丝菌DNA提取方法的比较
石滢 崔岩 赵莉佩 宋洋 李珊山
(吉林大学第一医院皮肤性病科,长春130021)
【摘要】 目的获得一种高效、快速、简便的提取球形孢子丝菌DNA的方法。方法以不同地区来源的球形孢子丝菌为
实验材料,采用CTAB法、异硫氰酸胍法、试剂盒法、碱裂解法4种方法分别提取球形孢子丝菌DNA。通过紫外吸光度法测
定DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增评价DNA的质量。结果虽然不同方法均可得到球形孢子丝菌的
样本均出现阳性条带,且条带亮度较好。结论碱裂解法是获得高质量球形孢子丝菌DNA的理想方法。
【关键词】 球形孢子丝菌;碱裂解法;CTAB法;异硫氰酸胍法;DNA提取
379.9
【中图分类号】R 【文献标识码】A 【文章编号】 1673-3827(2015)10—0216-04
ofDNAextractionmethodsfrom
Comparison Sporothrixglobosa
SHI Shan·shan
Ying,CUIYah,ZHAO Yang,LI
Li—pei,SONG
and 130021,China)
(DepartmentofDermatologyVenereology,FirstHospitalofJilinUniversity,Changchun
Tofinda and DNAextractionfrom
【Abstract】0bjectiverapid,effectiveeasy-to·perform protocolSporothrixglobosa.Methods
Four as extraction
methods,suchCTAB-extraction,guanidinethiocyanateboiling-extraction,alkalinelysis·extraction,DNAkit,were
basedon isolatesfromdifferent and oftheDNAweredeterminedultraviolet
eompared Sporothrixglobosa regions.Thepurityyield by
DNA wasevaluatedwith andPCR Itshowedthat
absorptionspectrum.Thequality agarosegelelectrophoresisamplification.Resdts
allmethodscould alkaline wasbetterthanothersforthe and oftheDNA.Basedon
getDNA,but lysis-extraction purityyield degener-
ated of ofthecalmodulinfor foundall showed Alkaline
fragments PCR,we
primem genes samples brightstripe.Conclusionslysis—
extractionisthemostsuitablemethodfor DNAfrom
extractinghighquality Sporothrixglobosa.
extration
【Keywords】Sporot
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