肝癌HepG2细胞GCF基因低表达细胞系的建立及辐射效应研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………5 研究论文肝癌HepG2细胞GCF基因低表达细胞系的建立及其辐射 效应的研究 前言………………………………………………………………11日{J吾………………………………………………………………11 材料与方法………………………………………………………12 结果………………………………………………………………27 附图………………………………………………………………33 附表………………………………………………………………36 讨j沦………………………………………………………………37 结论………………………………………………………………38 参考文献…………………………………………………………40 综述 肝癌分子靶向治疗的研究进展…………………………．42 致谢……………………………………………………………………52 个人简历………………………………………………………………53 中文摘要 肝癌HepG2细胞GCF基因低表达细胞系的建立 及其辐射效应的研究 摘 要 目的：原发性肝癌(Primary hepatic 的恶性肿瘤之一，发病率在恶性肿瘤中居世界第五位，死亡率居第三位， 且我国是肝癌的高发地区之一，肝癌严重威胁着我国人民的健康及生命。 肝癌的治疗，主要有手术、化学治疗、射频消融治疗、介入治疗、放 疗等。肝切除和肝移植是肝癌最有效的治疗方法。与其他恶性肿瘤相比， 肝癌术后复发率较高，且肝移植不能普及，肝癌的手术治疗受到限制。近 年来随着三维适型放疗技术的发展，放射治疗已经成为治疗肝癌的重要手 段。放疗联合化疗及中医中药治疗疗效更好，它仅次于手术切除，特别是 在无法切除的肝癌治疗中发挥着越来越重要的作用。由于放疗对于肿瘤周 围的正常组织存在损伤，因此，我们试图通过增加肝癌细胞对放射治疗的 敏感性来提高放疗疗效、减少放疗的副作用，改善肝癌患者的预后。 一些研究证实辐射可引起多种肿瘤细胞IER5基因表达增加，mR5 7 基因在辐射诱导细胞凋亡中发挥一定作用。转录因子是一群能与基因5 端上游特定序列专一性结合，从而保证目的基因以特定的强度在特定的时 间与空间表达的一类蛋白质分子。GCF(GC factor)就是一个转 binding 录因子，由一个长度为3kb的mRNA编码，广泛存在于人体组织细胞中， 在基因表达调控中发挥着重要作用。GCF通过与一些编码表皮生长因子 前期研究显示：在辐射诱导IER5基因表达增高的启动子区域内可能存在 以及其各自可能的转录因子(GCF、NFI、T1Rinverted 【2】 O 核糖核酸干扰(RNA stranded RNA(double 以致于下调或抑制靶基因的表达，从而产生相应功能表型的缺失。RNA 中文摘要 干扰技术，是功能基因分析的重要方法，其中最主要的方法是应用化学合 成的小分子RNA(SmallRNA，siRNA)进行干扰。 interfering 细胞从第一次分裂结束开始到第二次分裂结束为止所经历的全过程， 称为细胞周期，其包括细胞间期和分裂期。其中细胞间期又分为DNA合 (M期)，又分为前期、中期、后期及末期。细胞周期按Gl期_S期一G2 期_M期的顺序进行，其中有两个关键的“检定点”：G1／S及G2／M。细 胞周期阻滞(cellcyclearrest)是指细胞周期未能通过检定点，进入细胞周期 的下一阶段。 射与GCF的关系的相关研究报道。本课题选择离体培养肝癌HepG2细胞 表达细胞模型，研究抑