高效液相色谱法检测胃液中色氨酸和利多卡因.pdfVIP

第37卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第11期 Chinese of 1617～162l 2009年11月 Journal AnalyticalChemistry 高效液相色谱法检测胃液中色氨酸和利多卡因 马东杰1，2 许旭¨ 廉伟3 陈颖4、 吴云林4 1(中国科学院上海有机化学研究所，上海200032)2(中国科学院研究生院，北京100039) 3(上海市阂行区中心医院消化科，上海201100)4(上海市瑞金医院消化科，上海200025) 摘要采用高效液相色谱一紫外．荧光和高效液相色谱一紫外．质谱联用法，证明胃癌患者胃液中存在的荧光 物质主要为色氨酸。建立了反相高效液相色谱一双波长同时紫外检测法定量分析胃液中色氨酸和利多卡因的 11119 x4．6 方法。使用KromasilC18柱(150 mill，5p,m)，以含0．1％三氟乙酸的甲醇溶液与含0．1％三氟乙酸水 溶液为流动相，梯度洗脱分析。色氨酸使用278am检测，浓度在0．5—200 mg／L范围内峰面积对浓度的线性 相关系数为0．9994；利多卡因使用254am检测，浓度在20一5000叫L范围内相关系数为0．9992。色氨酸和 利多卡因的检出限分别为0．15和5n【lg／L；平均加标回收率分别为70．8％～110．4％(色氨酸)和87．1％一 116．2％(利多卡因)。利用本方法对38例胃癌患者和48例非胃癌患者的胃液进行测试，两组胃液中色氨酸 的含量存在一定的差异。 关键词胃液，高效液相色谱，色氨酸，利多卡因 1 引 言 胃癌是我国常见的恶性肿瘤，死亡率很高…。降低胃癌死亡率的关键是提高早期胃癌检出率旧1。 利用体液中的内源性荧光物质(或称同有荧光)来检测疾病是近年来兴起的一种简便的实用技术，体液 内有许多内源性荧光物质，它们形成的综合荧光光谱在良性病变患者及肿瘤患者之间存在差异口’41。 o和Leiner【61等分析了肿瘤患者与正常人血清荧光光谱的差异，试图找到一 20世纪80年代，Chemitskii【5 种肿瘤的试验室诊断方法，但没有取得满意的结果。丁世刚等p1研究了胃液荧光光谱，发现癌症患者 胃液的荧光强度高于良性病患者胃液的荧光强度，对700多例各种胃内疾病患者胃液进行高效液相色 谱荧光检测，认为该方法具有较高的敏感性和特异性【7J。并收集液相色谱荧光峰流出成分进行电喷雾 质谱分析，推测荧光物质中可能存在色氨酸旧J，但在高效液相色谱分离胃液时荧光物质未得到较好分 离，共存成分多，严重干扰了对结果的判定，也未能判断目标成分的含量。 本研究采用高效液相色谱．紫外一荧光和高效液相色谱．紫外-质谱联用技术，在对胃液成分足够分离 的基础上，证实胃癌患者中胃液中的特征荧光物质主要为色氨酸；同时检出受检者胃液中存在的利多卡 因，它来自受检者胃镜检查前口服的利多卡因胶浆。以此为基础，用高效液相色谱建立了胃液中色氨酸 和利多卡因的定量分析方法。结果显示，胃癌患者和非胃病患者的两组胃液中色氨酸的含量存在差异。 2实验部分 2．1仪器与试剂 996型二极管阵列检测器，Waters柱温箱， 色谱．紫外．荧光联用系统，包括Waters600泵，Waters Waters 1 工作站(杭州军锐公司)。Agilent100系列高效液相色谱一二极管阵列检测一MSDSL质谱检测器，Chem- Kromasil nunx4．6 mm，5 KRl00-5型C18柱(150 p,m)。 2009-02．19收稿；20