化学发光探在浅表肿瘤诊断以及活性氧检测方面的应用.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 、I在生物组织中不断产生蓍活性氧自由基，有些活性氧的生成量报徽小．不易 ＼ 被探铡到；有些生成量较大．可以用某些检涌手段进行测量。随着生命科学研究 的不断扩大和深入．人们已经逐渐认识到多种疾病的发生发展及机体的衰老都与 活性氧的活动密切相关，如老年痴呆等神经系统疾病，动脉粥样硬化，缺血再灌 综合症以及癌变等等．由此可见，探测生物体内活性氧的产生．分布和含量，对 、／ 于基础研究或临床应用都具有十分重要的意义。， ／ 本论文的研究工作就主要集中在利用化学发光探针与单态氧间的反应．将高 灵敏的光学成像检测技术应用于生物体系中活性氧的探测上，同时还提出了一种 新颖的单态氧、超氧阴离子控浏方法，并对其机理进行了初步的探讨。论文中首 先介绍了单态氧的产生途径及主要豹探测方法．然后就研究工作中主要使用的一 种可以特异捡测102和02一的高灵敏化学发光探针一一海萤荧光素类似物 (CypridiQaLucffe．血A．alog，CLA)豹性能做了详细介绍。 在第一部分的实验工作中，主要介绍了一种纳米级化学发光探针的制作方法 及其在光动力学诊断上的应用。该探针是在化学发光试剂MCLA分子的外层增 加了白蛋自的包被，形成MCLA．自蛋自混杂的颗粒．由于生物体内在不断产生 着活性氧自由基，当把化学发光试剂MCLA用于活体时，MCLA很快就会被生 物体自发产生的自由基所消耗掉。所以，我们就产生了这样的想法，将MCLA 用自蛋白保护起来，在体内随着蛋白豹酶解．MCLA才被逐渐的释放 样就可以减少在体使用时MCLA分子在运输过程中的损耗。制作的纳 此纳米探针可以随血液循环遍布生物体的全身。体外及在体实验结果均表明，纳 米探针可缓慢释放MCLA，比未经过包被的MCLA反应要延时很多。采用该方 法制作出来的化学发光探针。探针包被物可在生物体内自然降解，经裸鼠在体实 验使用，实验动物束发生过敏及栓塞现象，证明了该探针豹安全性。实验中，从 荷瘤裸鼠的尾静脉注射血卟啉衍生物HpD和纳米探钟，经光激发，并使用ICCD 成像．在肿瘤部位可看到明显的发光影像。实验证明．由纳米级化学发光探针所 中文摘要 V 介导的发光延时效果明显．体外和在体实验均收到令人满意的效果一 第二部分的工作中，提出了一种新颖的102、02一检测方法，该方法对102 和02-的检测有很高的灵敏度和特异性．同时具有操作简单、方便等特点N实验 中发现，当用高灵敏单光予计数系统检涮自然氧分压状态下FCLA的水溶液对， 只能观涌到极微弱的化学发光，其原因是自氧化所产生的102和02_与FCLA分 子反应，产生了化学发光：但当向其中加入人血清白蛋白(HSA)后，可观察到 体系的发光增强，其发光的峰值在525nm：实验中通过充N2除尽体系中的溶解 氧后．发光也随之消失。由此可判断，由液体中溶解氧自氧化所产生的102和 02-在化学发光的生成中起着能量供体的作用。根据实验现象，本研究小组提出 虫荧光素反应检测AWl的过程有相{I；【之处。该方法检测灵敏度高，专一性强， 在医学研究和临床应用上，如光动力学诊断和光敏剂的剂量学研究，将会有极大 的应用前景。 关键词：活性氧己l。8站单态氧，化学发光，MCLA·光动力学诊断，FCLA 人血清白蛋白溆 H Reactive produced in tissue．Tk spoc墒e$Otos)is oxygen continuouslybiology the of$omcRO$a北觚whileothers andc吼be quantities a”great