仿刺参中抗菌肽分离纯化及抗菌和肮肿瘤活性研究.pdf

辽’刊币范大学硕十学何论文 }商 要 仿刺参(ApostichopusJaponicus)是一种重要的海洋物种，主要分布在太平洋的东西 两岸及印度洋中。海参商业品种的育苗工作开始于20世纪80年代，日本、中国、印度 等国家先后取得成功。由于其含有丰富的黏多糖和蛋白质等，且具有营养价值和药用价 值高等特点，因此在山东和辽宁等地很快成为一种重要的养殖品种。 本研究采用甲醇浸提和凝胶过滤层析的方法，以仿刺参肠道为材料来提取抗菌肽， 并采用滤纸片扩散法和MTT法测定其体外抗菌活性及体外抗肿瘤活性。其中，抗菌活 性实验对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌、枯草杆菌、溶壁微球 concentration， 菌、迟钝爱德华菌、鳗弧菌8种常见菌的最小抑菌浓度(Minimalinhibitory 抗菌肽的组成进行了进一步的分析。 对仿刺参抗菌肽粗提物进行凝胶过滤层析分离后，得到了3个不同的组分，分别命 名为A1、A2、A3，活性实验发现仿刺参抗菌肽A3具有显著地抑菌活性和抑肿瘤活性。 MIC结果显示，仿刺参抗菌肽A3对溶壁微球菌、副溶血弧菌、大肠杆菌、金黄色葡萄 球菌、哈维氏弧菌、迟钝爱德华菌、鳗弧菌、枯草杆菌的最小抑菌浓度分别为0．5mg／ml、 有四个不同的组分构成。 本实验对仿刺参抗菌肽的功能进行了研究，发现了仿刺参抗菌肽A3对革兰氏阳性 菌和革兰氏阴性菌具有明显的抗菌活性，对肺癌A549细胞增殖的抑制作用呈明显的剂 量依赖关系。这一研究可能对抗菌及抗肿瘤新药的研发具有一定的意义，近年来，抗生 素被人们大量使用，由此带来了细菌耐药性问题，为了解决这一问题，我们可以考虑使 用仿刺参抗菌肽来取代抗生素。海参养殖业近年来快速发展，但是快速发展和管理落后 使各种病害问题也日益严重，因此我们从海参肠道内提取到抗菌肽，可以将其应用于水 产养殖中，以应对各种病害。 IC) 关键词：仿刺参；抗菌肽；抗菌活性；SDS—PAGE；最dql：P菌浓度(M 仿刺参中抗菌肽的分离纯化及抗菌和抗肿瘤活性研究 IsolationandPurificationofthe from PeptidesApostichopusJaponicus andEvaluationofitsAntibacterialandAntitumorActivities Abstract The isan marine foundinthe ApostichopusJaponicuseconomicallyimportantspecies PacificandIndianOcean．Since1980、S，seed ofseveralcommercial rearingtechniques havebeen establishedin andIndia．Seacucumbers species successively Japan，China possess nutritionalandmedicalvalueas areabundantin and high they mucop01ysaccha“de afavored in ofthis are became proteins．Becausereason，theyrapidly