拟南芥AtVP34-RNAi突变体研究.pdf

摘要 摘要 哺乳动物及酵母细胞研究发现，磷脂酰肌醇．3激酶(P13KC3)在细胞内吞、 自噬、液泡蛋白分选等多条胞内运输途径中有关键作用。然而，对P13KC3在拟 南芥中的唯一一个同源基因AtVPS34研究较少，但确定的是AtVPS34具有 了AtVPS34mRNA表达程度不同的T3、T4代纯合株系。通过一系列表型观察、 生理、分子指标测定发现，AtVPS34-RNAi各株系莲座生长速度、黄化苗下胚轴 细胞长度均小于野生型，主要归因于AtVPS34-RNAi细胞伸长能力的显著下降与 细胞分裂能力的轻微下降。主根伸长、侧根发生及重力响应在AtVPS34-RNAi中 均有明显缺陷，而极低浓度的生长素MA或NAA即能回补这些缺陷。NAA处 理后，AtVPS34-RNAi突变体中生长素响应基因的转录本水平显著高于野生型。 著提高。指示生长素响应的DR5rev：GFP在突变体根尖及其胚根细胞中定位有所 改变，荧光信号在根尖静止中心处变弱，在更多根冠柱状细胞中出现甚至变强。 生长素外运蛋白PINl、PIN2在突变体根中定位明显异常，而磷脂酰肌醇．3激酶 抑制剂能在野生型中模拟出同样的PIN定位模式。综上，我们推测AtVPS34可 能通过参与调控TIRl．AUX／IAA．ARF生长素响应信号通路及PIN介导的生长素 极性运输而调控拟南芥的生长发育。 ’ 关键词：磷脂酰肌醇．3激酶细胞伸长重力反应生长素极性运输生长素响 应 Abstract Abstract in roles various Phosphatidylinositol3-Mnase(P13KC3)plays pivotal intraceUular as vacuolar traffickingprocesses，suchendocytosis，autophagy,and in andmammalian isknownits about yeast cells．Nevertheless，little proteinsorting in thatAtVPS34hasP13KC3 onlyhomologueArabidopsisexcept activity．Since AtVPS34mutantis chosetoknockdownthe levelof lethal，we emb巧omc expression RNA obtained 13 T4 wim AtVPS34 and lines by interference,and homozygous differentRNAinterferencelevels．Aseriesof andmolecular physiological analyses that