稀土元素引起小肝脏损伤的分子机制.pdfVIP

稀土元素引起小鼠肝脏损伤的分子机制 中文摘要 中文摘要 稀土元素是位于化学元素周期表IIIB族中的钪、钇及15种镧系元素的总称， 由于具有独特的理化性质而在农业、工业、文化、医药及同常生活诸多领域广泛 应用，从而导致越来越多的稀土化合物不可避免地通过食物链进入生态环境和人 体。作为生物体非必须元素，势必对人类健康形成威胁。人们就其毒理学效应己 开展了广泛的研究，但有关稀土元素引起肝脏损伤的作用机制研究得还不够深入， 且多集中于单一稀土元素或稀土混合物。鉴于此，我们比较研究了镧、铈、钕三 种稀土元素对ICR小鼠肝脏损伤的分子机制并探讨了稀土元素的4f电子层结构和 变价特性与肝脏损伤的关系，旨在为稀土的生物安全应用提供参考。 论文主要涉及以下内容： BW)对小鼠肝脏的毒 (1)研究了连续14天腹腔注射氯化稀土溶液(20mg／kg 性效应及其分子机制。腹腔注射14天后，发现小鼠体重并未发生明显变化，但肝 对照。通过光镜观察至lJLa3+处理后引起肝组织嗜碱粒细胞增加和中央静脉淤血， Ce3+处理引起肝细胞坏死和嗜碱粒细胞大量增加，Nd3+处理组呈现肝脏组织中央静 脉淤血和明显的血管扩张；血生化分析表明稀土处理后谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、 天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、假胆碱酯酶活性显著上升，白蛋白／球蛋白比值下 其次为Nd”处理，L矿处理最轻。肝组织抗氧化结果显示：三种稀土元素均导致肝 脏组织活性氧自由基大量积累，脂质过氧化加剧，而超氧化物歧化酶、过氧化氢 酶和抗坏血酸过氧化物酶等抗氧化系统酶活性明显下降，非酶抗氧化剂还原型抗 坏血酸和还原型谷胱甘肽含量也显著降低，表明稀土元素削弱了小鼠肝脏的抗氧 因子_cB、巨噬细胞移动抑制因子、肿瘤坏死因子吨、白细胞介素“、白细胞介素 一lp、C反应蛋白、白细胞介素_4和白细胞介素一10等炎性细胞因子的基因及蛋白表 土元素处理引起的肝脏病变与自由基的大量积累及炎性细胞因子的表达增加有密 中文摘要 稀土元素引起小鼠肝脏损伤的分子机制 切关系，且也可能与稀土元素的4f电子层结构和变价特性有一定的关系。 (2)深入研究了不同剂量CeCl3溶液连续灌胃45天后引起小鼠肝脏炎症反应 的信号途径。结果表明随着灌胃剂量的升高，小鼠的生长逐渐减缓，肝体比增加， Ce元素在肝脏明显积累，在光镜下观察到肝细胞结构大面积模糊、间质管充血、 水样变性、炎性细胞浸润及细胞核空淡化，肝功能分析显示血清谷丙转氨酶、碱 性磷酸酶、天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、假胆碱酯酶和亮氨酸氨肽酶活力也随 之上升，而免疫球蛋白IgM含量明显下降。这表明高剂量CeCl3影响了肝脏的正 (IM)的表达受到抑制，由此进一步证实CeCl3引起的小鼠肝脏炎症反应与炎性 细胞因子表达的改变紧密相关。我们推测TLRs表达量的增加诱导NIK的活化， 促炎细胞因子个一炎症发生_÷肝损伤。 及Ce3+对谷丙转氨酶(ALT)活性和构象的影响。发现在一定浓度范围内，三种稀 土离子在体内和体外均可激活LDH，且低浓度时LDH活性逐渐增加，高浓度时其 活性逐渐下降，其中ce3+的激活作用最显著，其次为Nd3+；酶动力学分析表明LDH 级结构的改变，其中Ce3+处理后LDH结构变化最大，其次为Nd3+处理。推测稀土 离子可通过改变酶的结构导致底物在酶活性中心的结合及酶催化活性发生变化。 本研究再次证实稀土元素引起乳酸脱氢酶活性及构象的变化可能与稀土元素的4f 电子层结构及变价特性有关。 在一定浓度范围内，Ce3十在体内和体外也均可显著激活ALT；体外酶动力学分 析表明Ce”在低浓度范围内与ALT的亲和力较高。光谱学分析表明，Ce3+可以与 ALT结合，结合位点为1．72，结合常数分别为4．82x108 lI 稀土元素引起小鼠肝脏损伤的分子机制 中文摘要 象的变化有关。 关键词：稀土元素；小鼠肝脏；氧化应激；炎症反应；酶结构一功能