乳链菌肽(niin)分子中第29位丝氨酸的功能研究.pdfVIP

， ，泔 0 f删舢俐伽伽枷伽舢『f『『肼 Y1 7351 1IIIIl9UIlil 摘要 lactis)或乳房链球菌 乳链菌肽(nisin)是由部分乳酸乳球菌(Lactococcus (Streptococcus 可有效抑制包括多种食物腐败菌和病原菌在内的革兰氏阳性菌，并对人体安全无毒。 因此nisin作为一种天然食品防腐剂广泛应用于多个国家和地区的食品行业中。但 nisin在功能上存在不足之处，如只有在低pH值条件下才比较稳定，抑菌谱不广等， 这些不足限制了nisin的应用。 长期以来，人们对nisin进行了大量的研究，试图通过对nisin结构和功能间的关 系的研究，来改善nisin的性质，扩大nisin的应用范围。以前研究的重点主要关注于 nisin的环状结构及铰链区，也发现了一些规律。近期本实验室在研究乳链菌肽抗性 位丝氨酸还是nisin成熟分子中唯一未经翻译后修饰的丝氨酸，这些发现提示第29位 丝氨酸可能对nisin的功能有重要影响。 码子进行定点突变，将其突变为其余的19种氨基酸，通过构建重组表达质粒并分别 lactis 转化至乳酸菌Lactococcus 酸菌。对表达的nisinZ突变体的性质进行了检测，结果发现：将第29位丝氨酸突变 为天冬氨酸或丙氨酸，所得到的$29D nisinZ、$29A 1．2429出现了抑制作用：而且$29D 兰氏阳性菌Staphylococcusepidermdis nisinZ突变体对温度的稳定性，特别是在高pH值条件下对温度的稳定性较野生型 nisinZ有显著提高。 上述研究结果证明第29位丝氨酸与nisinZ的活性、稳定性及抑菌谱有密切关系， 但关于第29位氨基酸与nisin功能的关系目前仍有很多细节不够清楚，如：同样引入 nisinZ较wT降低，这需待进 正电荷氨基酸，$29DnisinZ活性较wT增大，而$29E 一步的研究。 文中创新点：本文通过对nisin中特殊的29位氨基酸进行定点突变，研究了其与 的性质，获得应用更广泛的nisin提供了可行的依据。 关键词：乳酸菌，乳链菌肽，定点突变，结构，功能 II l 一一———————————————————————————～——————————————————————————————————————————————一一一 Abstract some ofLactococcuslactisor akind Nisin，producedby species Streptococcusuberis，is of as cationic andisclassified lantibiotic．Nisincall inhibit peptide type—A effectiv