农肥和化肥施用大豆根瘤菌和土壤固氮菌多样性的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 我国东北黑土区目前已成为中国重要的商品粮基地，大豆是黑土地的主要种植作物之一。 由于过度垦殖和不良的经营管理方式，黑土农田质量退化日益严重。人们为了追求农作物的 高产量，长期向农田施加大量化肥肥料，这种措施对土壤固氮微生物多样性可能造成一定程 度的影响，土壤固氮微生物多样性的变化逐渐引起人们的广泛关注。 本论文基于已经进行6年的黑土培肥定位试验，设置了6种处理：(1)不施肥对照、(2) 农肥低量、(3)农肥高量、(4)化肥低量、(5)化肥高量、(6)农肥化肥等量l：1，并采集 各处理土壤样品和大豆根瘤，提取土壤总DNA和直接从大豆根瘤中提取根瘤菌DNA，采用 PCR．DGGE与克隆测序技术相结合的方法，研究分析了施用农肥和化肥对大豆根瘤菌和土壤 固氮菌多样性的影响，通过本试验的研究结果将为生产实践中科学合理的利用土壤氮素和指 导氮素肥料的施用提供科学依据，为保护黑土固氮菌生物多样性提供科学参考。主要研究结 果如下： 农肥和化肥施用对大豆根瘤菌多样性影响：对照(不施肥)处理的nim基因条带数和多 样性指数最大，各处理多样性指数差异显著，大小顺序为：对照农肥高量农肥低量=农化 1：1化肥高量化肥低量。农肥和化肥的施用均降低了大豆根瘤菌多样性，其中化肥处理更明 显的降低了根瘤菌多样性。施用化肥的处理与其他处理相似性仅为66％，说明施用化肥的处 理与其他处理相比大豆根瘤菌群落结构差异较大，显著地改变了根瘤菌的群落结构。 DGGE测序结果显示，大部分根瘤菌属于慢生根瘤菌属。肥料种类对大豆根瘤菌多样性指数 和大豆根瘤菌群落结构的影响效应均大于施肥量对其的影响。 农肥和化肥施用对土壤固氮菌多样性影响：土壤固氮菌多样性指数大小顺序为：对照 农肥低量农化1：1化肥低量农肥高量和化肥高量。农肥和化肥施用均降低了土壤固氮菌多 样性，其中高量处理更明显的降低了固氮菌多样性。施肥量对土壤固氮菌多样性指数的影响 效应大于肥料类型对其的影响。在相似度60％水平上六个处理聚成了两群，化肥高量和化肥 低量聚成一群，另外四个处理聚成一群。肥料种类的不同对土壤固氮菌群落结构的影响作用 大于施肥量对其的影响。 总体来说，农肥和化肥抑制了大豆根瘤菌和土壤固氮菌的生长，降低了大豆根瘤菌和土 壤固氮菌的多样性，并对其群落结构造成一定程度的影响。 关键词农肥；化肥：刀口基因：多样性 Abstract Effectsof andChemicalFertilizer O玛anic onthe ofS ApplicationsDiVersity oybean RhizobiaandSoil Bacteria Nitrogen—nxing Abstract Theblack in so订areaNonheastChina isone producemanycommodity ofthe grain．Soybean main ofblack tothe two blacksoil soilinNortheast crops soilland．Compared foreign region，black China tooVe卜cultiVationand deVeloppedrelatjVely