外源钙对沉水植重金属胁迫的缓解效应及机理研究.pdfVIP

摘要 摘要 本文以分布广泛的沉水植物一黑藻(Hydrilla canadensis)和菹草(Potamogeton 生化和差异蛋白质组学技术研究了适宜浓度的外源钙(Ca)对沉水植物重金属胁迫 的缓解效应和机理。结果表明： 矿质营养、光合色素、可溶性蛋白、小分子保护物质以及渗透调节物质等指标的变 化。结果表明：单一Cd胁迫使黑藻体内Cd含量极显著增加，并造成明显的矿质营 黑藻对Cd的蓄积，并在一定程度上减轻了Cd胁迫所造成的矿质元素失衡。Cd处 理使黑藻体内光合色素含量、叶绿素a／b值和可溶性蛋白含量大幅度下降并显著降 的合成并提高了黑藻的抗氧化能力。此外，Cd胁迫显著促进黑藻大量积累脯氨酸、 化。可溶性糖则与之相反。说明外源Ca能通过抑制Cd的蓄积，延缓光合色素、可 溶性蛋白和可溶性糖的降解，维持高的总抗氧化能力和抗氧化物质含量以及矿质营 养平衡等途径来增强黑藻对Cd胁迫的抗性。 达的影响。研究结果表明：与单一Cd胁迫相比，外源Ca显著提高了伊乐藻体内超氧 氧的积累。双向电泳图谱分析结果表明：Cd处理与对照相比，蛋白丰度变化在2倍以 显著变化，其中42个蛋白点被抑制或下调，21个蛋白点被诱导或上调。我们对这些差 异蛋白点进行了质谱鉴定，其功能分为7类：光合作用、能量代谢、转运、防御、信 号转导、转录和翻译以及功能未知蛋白。其中，与光合作用和能量代谢相关的蛋白所 占比例较大。这些结果表明外源Ca通过提高保护酶活性、减少活性氧积累以及调控某 些特异蛋白的表达等途径来缓解Cd胁迫对伊乐藻的毒害作用。 摘要 (3)研究了外源ca对Cu胁迫下伊乐藻体内生理生化指标及蛋白质表达的影响。 mM 结果表明：O．01 Cu处理4d后，Cu大量累积，伊乐藻呈现出多种重金属毒害症状， 如矿质营养吸收紊乱，光合色素、可溶性蛋白、渗透调节物质、总抗氧化能力(T-AOC) 和丙二醛(MDA)含量升高，细胞死亡加剧。与单一Cu毒害相比，外源Ca减少了Cu 的累积并有效地缓解了Cu造成的伊乐藻矿质营养吸收的失衡，还提高了伊乐藻体内 光合色素、可溶性蛋白、脯氨酸和可溶性糖以及T-AOC和触A、GSH、NP．SH的水平； 降低了02‘’产生速率、H202、MDA含量和细胞死亡，缓解了cll胁迫所诱导的氧化胁迫。 双向电泳结果发现，Cu胁迫下有131个蛋白点的表达量发生显著差异，其中有34个蛋 白点被诱导或上调，97个蛋白点被抑制或下调：与Cu毒害相比，有76个蛋白点的表 达在外源Ca处理后发生显著变化，其中55个蛋白点被诱导或上调，21个蛋白点被抑制 或下调。这些结果表明外源Ca通过减少Cu的蓄积、改善生理代谢、增强抗氧化系统、 缓解氧化胁迫以及调节蛋白质的表达等途径来增强伊乐藻对CuD迫的耐受性。 CuPh迫能力的影响。结果表明：外源C耐Cd、Cu胁迫具有明显的缓解作用。外源ca 处理明显减少了Cd、Cu在菹草叶片内的累积，促进菹草对营养元素的吸收，有效地 维持了矿质营养吸收的平衡。此外，外源Ca显著提高了菹草叶片中光合色素、可溶性 处理却使菹草的抗氧化能力降低，显著提高了02’。产生速率、H202和MDA含量，加剧 了Cd、Cu胁迫对菹草的损伤。这表明外源Ca对沉水植物重金属胁迫的缓解效应与诱 导和调控Ca2+_CaM信使系统密切相关。 关键词：沉水植物；重金属；钙：生理；缓解；蛋白质组学 II Abstract Inthe common presentstudy，threesubmergedaquaticplants(Hydrilla as Elodeacanadens西and chosenthe materials， Potamogetoncrispus)were experimental for and