果胶多糖的降解其产物的分离分析与活性研究.pdfVIP

果胶多糖的降解及其产物的分离分析与活性研究 摘要 果胶多糖是一类结构复杂的酸性杂多糖，是植物细胞壁的结构成分，在食品工业中 可用作增稠剂、胶凝剂等。近年来研究表明，果胶寡糖，尤其是寡聚半乳糖醛酸，具有 诱导植物抗性、抑Nd,鼠肝细胞中油脂的积累等生物活性，在食品、医药、农业等领域 具有广阔的开发应用前景。选择合适的方法对天然多糖分子进行结构修饰和改性以提高 其生物活性是常用的研究方法，降解也是进行结构改性的重要方法之一。本研究以来源 丰富的柑橘果胶为原料，采用化学法与生物酶法相结合对其进行降解，得出了以下研究 成果和结论： 1．本研究中所用柑橘果胶的部分理化性质：高效凝胶渗透色谱法测得其分子量大于 400 95．2％：间羟联苯法测得其糖醛酸含量为77．3％；滴定法测得果胶乙酰化度为29．55％， 甲酯化度为77．27％。 的诸多因素如荧光试齐Ij的种类、用量，荧光衍生化时间、温度，分离胶浓度及盐、酸等 进行了考察，并对其条件进行了优化。结果显示，每1．2 mg果胶寡糖(无酸、不含盐)中， 加入0．2mol·L1 tool·L．1 NaBH3CN溶液 8．氨基萘．1，3，6．三磺酸(ANTS)溶液3．75ⅣL、1．0 5“L40℃水浴反应16h，以8％的浓缩胶浓缩，在浓度为38％的分离胶上进行电泳(恒 流15mA)分析，电泳条带清晰，分离效果良好。 3．果胶单糖组成分析新方法．高效液相(HPLC)柱前衍生化法的建立：用3．氨基．9． 乙基咔唑(AEQ对混合标准单糖衍生后进行HPLC分析，优化色谱条件，并对该方法进 行了方法学考察。色谱条件：流动相为28：72的乙腈．水(0．1mol·L．1的醋酸铵缓冲液， mL·mill一，检测器为紫外检测器。在该色谱条件下，果胶中的各单 pH=4．3)，流速为1 糖均达到了基线分离。该方法的最低检测限达O．05／zg·mL1。用该方法对柑橘果胶进行 单糖组成分析，并与液相色谱(GC)法法进行比较，结果显示，HPLC与GC结果基本相 符，说明该衍生化方法可用于果胶的单糖组成分析。 4．果胶多糖的降解及寡聚半乳糖醛酸的制各：通过正交试验对降解条件进行优化， 最终确定，先以0．5mol·L-1的TFA，80℃水解果胶多糖5h，再以0．05 mg·mL1的酶解 液酶解60min以高效率地制备寡聚半乳糖醛酸。 5．果胶多糖及其降解产物的活性研究：利用滤纸片法对果胶多糖及其降解产物进行 抑菌活性测定，发现只有果胶降解产物中的寡聚半乳糖醛酸具有抑菌活性。采用MTr 法对果胶多糖及各部分果胶降解产物进行抗肿瘤(人的肝癌细胞SMMC．7721)活性测 定，结果显示，只有寡聚半乳糖醛酸具有抗肿瘤活性。 关键词：果胶多糖，降解，寡聚半乳糖醛酸，活性 StudiesonPectin andPectin Degradation Abstract of cell an kindofstructural wall，is Pectin，one vegetal extremelycomplex component andacidicunits．ItCanbeusedas whichismadeofneutral heteropolysaccharideup in