枯草芽孢杆菌B06脂肽类抗生素对黄瓜枯萎病菌抑制作用的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 本研究以枯草芽孢杆菌B006为研究材料，针对生产中连作造成的黄瓜枯萎病菌Fusarium 黄瓜根际产生的脂肽类抗生素的检测和枯萎病菌种群数量的监测，探讨抗生素的产生与枯萎 病菌数量、生防菌数量及病害发生之间的关系。明确该问题对深入理解生防枯草芽孢杆菌 B006在田间状况下的防病机理有重要的意义。 研究结果表明：枯草芽孢杆菌B006发酵液的甲醇提取物对黄瓜枯萎病菌菌丝的抑制作 用大于对辣椒疫霉病菌Phytophthora caps记i菌丝的抑制作用；但对P．capsici游动孢子萌发 的抑制作用明显大于对黄瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制作用，提取物原液在5min内可使辣椒 的分子量大小一致。以终浓度为106cfu·g-‘的接种量将生防菌B006菌剂施入无菌育苗基质中， 在黄瓜4~6片叶期时用固相萃取法提取根际的抗菌物质，并进行HPLC．ESI．MS分析，证明 可在根际检测到surfactin和fengycin，但未从对照处理根上检测到脂肽类抗生素。 本研究在前人的研究基础上，建立根际土壤中生防菌B006和黄瓜枯萎病菌KW2．1的荧 光定量PCR监测体系，生防菌B006的最低检测限为7．80E+01 cfu·g-1，黄瓜枯萎病菌KW2．1 的最低检测限为2 ng·g-1。 田间防病实验结果表明：在添加生防菌B006的基质中育苗，对黄瓜的出苗率和株高没 有显著的影响；在育苗基质中添加生防菌B006，同时移栽时生防菌灌根处理可降低根际枯萎 病菌数量和枯萎病的病情指数；生防菌两次灌根处理能够有效防治穴施有机肥病土中的黄瓜 枯萎病的发生，生防菌B006的定殖量高于对照组1个数量级，枯萎病菌KW2．1数量比对照 处理明显降低，延后发病期2周左右，在移苗5周时防效达到58．5％；穴施有机肥对根际黄 瓜枯萎病菌KW2—1的种群数量影响不明显，没有显著的防治效果优势。对根际脂肽类抗生 素的种类与含量进行检测，结果表明根际生防菌B006和枯萎病菌KW2．1的种群数量与脂肽 类抗生素的产生量没有明显的相关性；穴施有机肥的处理，根际脂肽类抗生素surfactin的量 高于其它处理。 关键词脂肽类抗生素；黄瓜枯萎病菌：枯草芽孢杆菌；荧光定量PCR；生物防治；动态监测 VII ABSl]RACT ResearchofBacillussubtilisB 006 Antibiotics Fusarium Lipopeptidesagainst f oxysporumsp．cucumerium Abstract Inthis usedBacillussubtilis B006瓠theresereh the of study，we material。with problem fusariunlwiltwhichcausedFusarium continuous by theB．subtilis cropping，throughdetecting B006 andthe ofstrainB006and