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澳大利亚平脐蠕霉胆红素氧化酶的产生、特性及应用研究.pdf
Code:10225
University
Code:B14015
Register
煳炒
Dissertationforthe ofDoctor
Degree
and of
Production,propertiesBODfrom
application
australiensisHD.1
Bipolaris
Candidate: Shi-chen
Huang
Supervisor: Zhaomin
Associate
Supervisor:
Academic for: Doctor
Degree
Applied
Speciality: Microbiology
Date
ofOralExamination:
University: Northeast
ForestryUniversity
万方数据
摘要
摘要
胆红素氧化酶(EC
1.3.3.5),系多铜氧化酶家族中的一个成员,因其能催化胆红素氧化
为胆绿素而得名。本文从玉米叶片病斑中分离出一株产胆红素氧化酶菌株,通过一系列的生
物化学手段纯化出胞外胆红泰氧化酶,继而对该酶生化、酶学、光谱学、电磁学、电化学特
性及制作成酶电极检测血液中葡萄糖含量等应用作了研究,其结果如下:
(1)胆红素氧化酶产生蔺的分离与鉴定
利用常规的微生物分离培养技术,从玉米叶片的病斑中分离出一株产胆红素氧化酶
(BOD)的真菌。在原始发酵液中其酶活为1000U/L。通过形态学、生理学特征和rDNA-
ITS(登录号为JN25l
1,属子囊菌门、格孢腔菌目、格孢腔菌科、平脐蠕孢属的澳大利亚平脐蠕孢霉(丑
为BOD的产生提供了新的资源。
(2)产酶条件的优化
aurtraliensis
通过单因素试验从供试的13种碳源、22种氮源中找到了适合R IID.1产生
BOD的适宜碳源为麦芽糖、庶糖、葡萄糖、果糖、可溶性淀粉及海藻糖。适宜的氮源有聚
蛋白胨、大豆蛋白胨、豆饼粉。适宜的诱导剂为CuS04。通过二水平部分因子试验及最陡
爬坡试验设计,从碳源、氮源、诱导剂、培养温度、培养基初始pH及摇床转速七个因素中
找到了对BOD产量影响最显著的三个因素即麦芽糖含量、发酵温度和CuS04含量,通过最
陡爬坡试验寻找到了逼近实验的中心点后,利用响应面法中的BB设计对上述三个主要因素
进行优化,得到:当培养基质中初始组成含量(g/L)为:麦芽糖5,硫酸铜0.32,大豆蛋
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