甘蓝型油菜不育因BnMs3ms3和BnRfrf的精细定位以及分子标记辅助选育效率评价.pdfVIP

forMaster Dissertation BnMs3／ms3 OFSTERILITYGENES FINEMAPPING EFFICENCY AND BRASSICANAPUSAND BnRf／rfIN BREEDING EVALUATIoNOFM哈。RKER．ASSISTED Ren Candidate： Meng-yang Jian-yi Supervisor：Zhao Dis B cipline：otany of Sciences， CollegeChemistryLife Normal University,Jinhua Zhejiang 321004，Zhejiang 甘蓝型油菜不育基因BnMs3／ms3和B即彤修的精细定位以及分 子标记辅助选育效率评价 摘要 叠基因和1对隐性上位抑制基因互作控制，并创立了三系杂种利用模式，为隐性 核不育杂种优势利用开辟了一条新途径。俎峰(2010)、董发明(2010)、倪西 源(201 互作调控。该不育系统具有不育性彻底、稳定且恢复源广等优点，但是育性受多 对基因互作控制，分离后代基因型复杂，不易选育，限制了其在杂交育种中的大 规模应用。为了确定育性基因和明确其作用机理，加速发挥该不育系统在生产上 的应用，我们在徐小栋(2009)对甘蓝型油菜育性基因Bnms3与B，2矿分别定位于 280Kb与4Mb的基础上，扩大群体和增加位置特异性标记分别对其进行更为精细 的定位，且利用分别与两基因连锁的共显性标记筛选临保系和两型系三种目标基 因型，评价标记辅助选育效率并进一步验证和油菜隐性互作核不育系统的遗传模 式。实验结果和结论如下： 一、隐性不育基因Bnms3位点的精细定位及共显性连锁标记的开发 设计位置特异性引物58对，利用BSA法筛出16个标记与Bnms3紧密连锁，经在 用于标记辅助选取育。 T 摘要 二、隐性上位基因B门，神勺定位研究及共显性连锁标记的开发 展81对标记，并整合前人研究中的4个标记，利用BSA法筛出10对标记与BnrfJ暴密 两侧标记为Seal7．5和Scal7．25。进而，在这两标记对应白菜基因组A7序列片段上， 设计位置特异性引物85对，并扩大定位群体至1767株精细定位B托币发现有16个标 理距离约为99．3Kb，大大缩短了徐小栋4Mb的定位结果。同时利用1099个单株的 MSL．r群体，从定位Bnrj所用的170个标记中获得10个与B门撩密连锁，同样， 三、甘蓝型油菜隐性核不育材料遗传模式的验证以及标记辅助选育效率评价 研究以20118A和MSL系统不育系和临保系以及分别与22个油菜品种(系) 杂交测交后代为材料，同时采用经典遗传学和分子标记辅助选择方法。研究表明： 不育株比例均符合3：l或13：3分离规律，而与20118A．TAM／MSL．TAM杂交产生 的8个F2均为全可育，证明育性符合l对隐性不育基因和1对隐性上位抑制基因 互作控制的遗传模式；进而采取反向验证方法，从925个F2分离单株中，用新发 或互交验证，准确率均达95％以上；根据22个测交品种的后代分离，B疗R厂位点上 只发现矽和矿两个等位基因，推测前人提出的第3个等位基因存在的频率很低， 基本可以根据2基因各2等位基因互作原理开展分子标记辅助育种；20118A和 MSL系统临保系和纯合不育系间交叉配组，后代育性分离结果显示来源于中国和 德国NPZ育种公司的这两个不育系统实际受相