甘蓝型油菜第七锁群主效含油量QTL的精细定位和候选基因筛选.pdfVIP

本研究在以下项目经费资助下完成： 1、国家自然科学基金重点项目：甘蓝型油菜A7连锁群上粒重／ 粒数QTL的精细定位和图位克隆(编号 2、国家高技术研究发展计划863项目：强优势甘蓝型油菜杂交 种的g,JN与应用(编号：2009AAl01105) 3、浙江省自然科学基金重点项目：油菜A7．含油量QTL区间3 个重要候选基因的克隆和功能分析(编号：Z310059) 摘要 甘蓝型油菜第七连锁群主效含油量QTL的精细定位和候选 基因筛选 摘要 油菜是世界主要的油料作物之一，油菜籽是我国重要的食用油来源，提高油 菜籽的含油量就当前最重要的育种目标之一。到目前为止，对油菜含油量QTL 定位的研究已有诸多报道，在油菜的所有连锁群中都能检测到与含油量有关的 QTL，其中分布在连锁群A1j QTL在多个环境中检测到，其他连锁群上与含油量有关的QTL只在少数或个别 环境中能检测到。但是这些研究目前都还在QTL初级定位的水平上，沿未有对 油菜主效含油量QTL进行精细定位的报道。本研究是在前人对含油量QTL进行 精细定位的基础上，进一步深度精细定位A7连锁群上主效含油量QTL，并通过 生物信息学分析对该．QTL区域可能与油脂形成相关的重要候选基因进行筛选。 锁群上一个连续的Scaffold序列的信息设计位点特异性标记，对已确定的OilA7 区间进行分子标记加密。再通过标记跟踪选择，发展含供体基因组片段的近等基 因系分离群体至BC4FJ 二重复的田间试验和含油量测定。含油量通过近红外分析仪测定，每份样品测量 三次，取其平均值。 在前期的初定位试验中， OilA7在11个不同环境中被检测到，其LOD值 在3．09至20．54之间，对群体的总贡献率为3．59％至24．69％，最终将其定位在 摘要 21．1cM的区间内。在此基础上，首先用由1 147株BC3Fl群体的标记基因型和其 相应BC3F2株系表现型对该含油量QTL进行确认，将QTL区间缩小至标记 间缩小至528KB，介于标记ESTl087和ESTl094之间。 本研究在此基础上进行，继续加密分子标记和构建更高世代的近等基因系， 间，共发展位置特异性标记149对，成功定位35对，其中定位于ESTl087与 相差约2个百分点，存在极显著(P=0．000)的差异。经生物信息学比对分析发 现在该目标区间内(65KB)存在14个与拟南芥高度同源的ORF，其中一个转 录因子，一个DNA重组修复蛋白，一个乙酰辅酶A转移蛋白，一个参与脂质代 谢以及一个参与线粒体膜和光合作用等6个ORF有可能是油脂合成有关的候选 基因，目前正在进行相关功能分析。 关键词：甘蓝型油菜；近等基因系；精细定位；含油量 Abs仃act ANDCANDⅡ)ATEGENESCREENING0F FINEMAPPING AMAJORFOROILCONTENTONLINKAGEGROUP QTL 1臌BRASSIcANAPUsL． ABSTRACT isoneofthemost sourcesasedibleoilintheworld．So Rapeseed important isoneofthe in oilcontentinseeds majorobjectivesrapseedbreeding．Up improving identified．However of foroilcontentin havebeen to number date，a QTLs rapes