油桐β-酮脂酰-ACP合酶Ⅲ基因克隆及序列分析（原版论文）.pdfVIP

江西农业大学学报 2013，35(4)：775—781 http：／／xuebao．jxau．edu．cn ActaAgriculturaeUniversitatisJiangxiensis E—mail：ndxb7775@ sina．COB 油桐 13一酮脂酰 一ACP合酶Ⅲ基因 克隆及序列分析 严方方 ，谭晓风 ，龙洪旭 (1．中南林业科技大学 经济林培育与保护教育部重点实验室 ，湖南 长 410004；2．中南林业科技大学 经济林育种与 栽培国家林业局重点实验室，湖南 长沙 410004) 摘要：B一酮脂酰 一ACP合酶——KAS是脂肪酸合成中的一种缩合酶，主要是在缩合反应中起作用。研究以近 成熟的油桐种子为材料 ，根据GenBank中蓖麻等已知的B一酮脂酰一ACP合酶基因KASIII的序列设计简并引 物，利用PCR、RACE等技术克隆得到了油桐KASⅢ基因的全长eDNA序列。该基因序列全长 1901bp，开放阅 读框为 1209bp，编码403个氨基酸，通过与其他物种的KASⅢ氨基酸序列 比对，油桐 KASⅢ基因与麻疯树的 同源性最高 ，达9o％。软件预测表明，KASⅢ蛋白等电点为5．78，存在跨膜结构域，整个蛋白质基本上是表现 出亲水性的。将该基因命名为 一kasHI。 关键词 ：油桐；KASm；基因克隆；序列分析；结构预测 中图分类号：$794．302 文献标志码 ：A 文章编号：1000—2286(2013)04—0775—07 CloningandSequenceAnalysisofFull—lengthcDNA Encoding Beta-·ketoacyl-A·CPSynthasem from Verniciafordii YAN Fang．fang ，TAN Xiao—feng， ，LONG Hong—XU ， (1．KeyLaboratoryofCultivationandProtectionforNon—woodForestTrees，CentralSouthUniversityof Forestry andTechnology，MinistryofEducation，Changsha410004 China；2．TheKeyLabofNon—WoodForest ProductofState Forestry Administration，CentralSouth University ofForestry and Technology，Changsha 410004，China) Abstract：Beta—ketoacyl—ACPsynthaseisafattyacidsynthesiSunderthecondensationeffectofenzyme， playsaroleinthecondensationreaction．TheprimerwasdesignedaccordingtotheKASIlIsequencesrecorded ingenbank．Full-LengthcDNA ofKASⅢ wasobtainedbycloningitwithPeR，RACE，etc．mehtods．Itwas l901bpinlengthandcontaineda1209bpORF (openreadingflame)encodingapeptideof403amino acids．aminoacidsequencealignmentwithotherspeciesshowedthattheKASⅢofVerniciafordiidisplayedthe highestsimilarity(90％)toJatrophacurca$．ThepredictedisoelectricpointoftheKASm was5．78．Amem— branespanningdomainwaspresentinthegene．Theproteinshowshydrophilicbasically． Keywords：Verniciafordii；KASII；genecloning；sequenceanalysis；structureprediction 油桐(Verniciafo