玉米pip5k因启动子的克隆与功能分析.pdf

摘 要 启动子在植物基因表达调控过程中起着重要作用。对于植物基因启动子的克 隆及其功能研究有助于了解信号传递途径和基因表达调控模式，．为植物转基因工 程研究提供理论依据。组织特异性启动子作为启动子的一种，在特定组织和一定 发育阶段启动基因的表达，能减少不必要的浪费。纠FiK基因家族作为根特异性 转录调控因子的一种，在协调植物的生长中起着至关重要的作用，特别是应对环 境因素时，有启动和促进根毛尖端增长的功能。 本实验通过生物信息分析剧刚K基因序列，克隆出刷P缎基因的启动子， 并经过启动子的删减实验，水稻的遗传转化及水稻组织的GUS染色实验等，取 得结果如下： 1．根据已知报告基因分析预测，设计出特异性引物，以玉米B73基因组DNA为 模板，扩增出该基因的启动子部分，命名为P2036。将P2036启动子的序列放在 启动子顺式作用元件预测网站上进行分析，预测到存在TATA盒、CAAT盒、 六个光应答元件和六个与诱导应答先关元件，预测该启动子是一个具有完整功能 的启动子。 连接并构建出5个5’端缺失启动子载体。 3．利用农杆菌介导法将构建的所有植物表达载体转化水稻，获得了34棵转基因 植株，对获得的转基因植株进行潮霉素检测，其中21棵检测为阳『性。将检测为阳 性的转基因各个组织进行GUS染色，根据染色结果得出，GUS基因均未在组织中 未发现有表达。 关键词：启动子，生物信息，遗传转化，GUS染色，根特异性 AbstaCt ill ProVidea role pl觚tgeneexpression． P删not懿play锄import姐t of theore石calb弱isf．ortlle and向nctionalpl觚tg锄epromoter cl砌ng stlldy con删buteto of a11d patllwaysgeneexpression tlle岫ilerStandingsi班al缸．锄sduction research．Tissue-specificpromotcr邪a mode，forpl柚tgen甜cengineering regIlla矗on to me of ina a11dacertain Start eXprcssiongenesp枷cularo玛anization promotcr en_tal waste．纠巧K root fI锄ily嬲t11e Stage，c趾raduce咖eCessaUgene dcvdopm ofa a访talrolein the of Specifictransc啦monf．actor，pla)，s CoordiIlatinggro、Ⅳ廿l to伽啊r0衄entaltlleinitiationand re唧nd f．aCtors， pl锄ts，inpamcul码t0 of∞0t fil埘ctions． pmm060nhair邱growtll 111thjs PP5K bioinfo