血管内皮生长因足细胞特异性下调与生理病理发育.pdf

摘 要 endothelial 血管内皮生长因子(vascular growth 形成和血管通透性诱导因子，特异性地作用于血管内皮细胞，具有维持血管正常状态和 完整性、增加血管通透性、促进血管生成的作用。在正常成人和动物组织中表达水平较 低，一些代谢旺盛、血供丰富的组织中VEGF表达水平略高，一些病理情况下可以过度 表达。 肾脏的主要功能是维持体液平衡，该过程中有两百万个肾小球参与血液滤过。在胚 胎和成年肾脏中VEGF主要表达于肾小球基质和球内细胞。在肾小管VEGF主要表达与 远端小管和集合管上皮。VEGF作为重要的血管生成调节因子在生理和病理条件下都发 挥着重要作用。过高或过低的表达都会引起肾脏生理功能的障碍。VEGF在胚胎发育时 期的功能和调节机制已被广泛研究。VEGF单基因缺失就可以引起胚胎致死，因此对于 VEGF在成年体内的研究很难进行。近年来通过基因打靶技术，成功实现了VEGF在成 年体内的敲除，并由此引起了肾脏生理功能的紊乱，表现为血栓性的微血管病。然而， 对于VEGF在成年体内的研究依然非常有限。随着抗VEGF治疗在人体病理条件下的 广泛应用，这一疗法显示出了越来越多的并发症。越来越多的人们开始意识到了VEGF 在成年体内的重要性，关于更多的VEGF在成年体内的信息有待人们去研究。 为了获得更多的VEGF在成年体内的信息，也为了更好的模拟临床的抗VEGF治 疗条件，理想的方法就是引入一种可调控可诱导的基因调节系统，利用该系统实现VEGF 基因在特定时间特定细胞的部分性下调。在本研究中我们引进了Tet．On基因调节系统， VEGF基因启动子区插入四环素操纵子序列(tet operator 结合。通过将上述两种转基因鼠杂交， 在得到的双转基因鼠 导致了很多肾脏方面的并发症。该研究通过不完全抑制或部分性降低VEGF表达，很好 的模拟了临床的抗VEGF治疗条件，将为临床诊断和治疗提供可靠的依据。 本研究的目的是探讨在小鼠肾脏足细胞特异性的降低VEGF基因表达对肾脏结构 和功能变化的影响。RT-PCR，Western blot以及免疫组化的结果显示，Tet．On调节系统 成功实现了对双转基因鼠肾脏VEGF表达的下调。通过电镜分析显示，VEGF基因下调 后，正常的。||子小球基底膜三层结构被改变，转基因鼠呈现肾脏功能的紊乱以及对肾脏疾 病的易感性。 关键词：血管内皮生长因子；转基因鼠模型；Nephrin启动子；足细胞特异性下调； 生理病理发育 U Abstract Vascular an endothelial essential and growth of factor(VEGF)isregulator angiogenesis vascular combineswithvascularendothelial permeability,and specifically cell(VEC)， maintainsnormalvascular ofthevascularand structure，increases permeability promotes is atlowl