岗梅实时荧光定量PCR内参基因的筛选.pdfVIP

热带作物学报 2015，36(6)：1119-1124 ChineseJournalofTropicalCro 岗梅实时荧光定量 PCR内参基因的筛选 郑夏生，叶国兵，纪晓宇，温羚玲，徐 晖 ，詹若挺 ，陈蔚文 毒岭南睾中药霁资源教育部重警点篓实验室广东广州510006 摘 要 为筛选适用于 岗梅实时荧光定量 PCR的内参基 因。应用实时荧光定量 PCR技术 ，分析 18S M (18S)、Actin (ACT)、 —tubulin (TUA)、卢一tubulin (TUB)、Cyclophili(CYP)、ElongationfactorJ— (EF— ) 和PotyM6曲¨itin(船 9)共 7个看家基因在 岗梅 的 8个不 同组织部位 中的表达情况 ，并利用 GeNorm、NormFinder 和 BestKeeD。r共 3个软件对每个看家基 因的表达稳定性进行评价。3个软件 的分析结果均表 明：18S、ACT和 TUA看家基 因的稳定性和相关性均较好 ，可在这 3个看家基因中选择 1个或 以J8S-AC 、18S—TUA组合作为岗 梅基因研究的 内参基 因。 关键词 岗梅 ：qRT—PCR；内参 基因 中图分类号 R28 文献标识码 A Selection ofReference GeneforReal-time PCR Study in llex asprella ZHENG Xiasheng，YE Guobing，jIXiaoyu，WEN Lingling， XU Hui，ZHAN Ruoting，CHEN W eiwen Research Center ChineseHerbalResource Scienceand E ern备 Gunagzhou University ChineseMedicine／Key LaboratoryolChineseMedicinalResource．from Lingnan，Ministry时Education，Guangzhou,Guangdong510006,China Abstract Thisstudyaimedtoselectreferencegene (S)forrealtimequantitativePCR (qRT—PCR)researchin asprella．Theexpressionlevelsofsevenhousekeepinggenes(HKGs)，including18SrRNA(18S)，Actin(ACT)， — Tubulin (TUA)，fl-Tubulin (TUB)，Cyclophili(CYP)，Elongationfactor --Or(EFla)andPolyubiquitin (UBQ)， in eightdifferenttissuesof asprella，were analyzed by qRT—PCR．Furthermore，theirexpression stabilitieswere evaluated by three software，including GeNorm，NormFinderand BestKeeper．Analysisdata showed that18S,ACT and TUA expressed stably and were related to each other in differenttissues of上 asprella．18S,ACT and TUA， combinationof 8S-ACTor18S-TUA，couldbeconsideredascandidatereferencegene(S)forqRT-PCR studyof asprella． Keywords llex ozprella；qRT—PCR ；Referencegene doi 10．3969／j．issn．1000—2561．2015．06．017 实 时 荧 光定 量 PCR(Real—