宫颈癌细胞促进血管新生斑马鱼模型的建立.pdfVIP

第 36卷 第 3期 中山大学学报 (医学科学版) V01．36 No．3 2015年 5月 JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) May 2015 宫颈癌细胞促进血管新生斑马鱼模型的建立 刘军秀，夏 梦，何 勉，姚书忠 (1．中山大学附属第一医院妇产科 ，广东广州 510080) 摘 要：【目的】建立宫颈癌细胞异种移植斑马鱼模型，研究其对血管新生的影响。方【法】以斑马鱼作为研究对象，使用 线性化的红色荧光质粒 pcDNA3．0+DsRed转染人宫颈癌 SiHa细胞，通过显微注射法将稳定表达红色荧光的SiHa细胞移植 入48hpf(发育后时数)的FLK转基因斑马鱼胚胎内，建立人宫颈癌斑马鱼模型，观察人宫颈癌细胞在斑马鱼胚胎体内存活、 增值和诱导血管增生情况，探讨宫颈癌细胞对斑马鱼模型血管新生的影响。【结果】注射不同数量人宫颈癌 SiHa细胞对斑马 鱼卵有不同的影响，其中注射50 100个细胞产生最佳的促进血管新生作用。注射 Matrigel的对照组斑马鱼在注射后的第一 天和第二天突出到肠下静脉血管篮外到卵黄的垂直分枝平均血管数频率分别为2．8％±1．4％和5．4％±2．2％。而注射人宫 颈癌细胞系SiHa的斑马鱼的新生血管数比对照组明显增加 ，在注射后第一天和第二天突出到肠下静脉血管篮外到卵黄的 垂直分枝平均血管数频率分别为8．O％±2．7％和27．4％±3．2％(P0．01)。【结论】本研究成功建立宫颈癌细胞促进血管新 生的斑马鱼模型，这为研究宫颈癌的发病机制、筛选新的抗肿瘤血管生成化合物和基因靶点研究提供了新的技术平台。 关键词：宫颈癌；斑马鱼：血管新生 中图分类号：R746．4 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2015)03—0456—05 Pro—angi0genicEffectsofCervicalCancerCellsinaZebrafishXenOtransplantatiOnModel LIUJun—xiu，XIAMeng，HEMian，YAOShu—zhong (DepartmentofObstetricsandGynecology，TheFirstAffiliatedHospital，Sunrat—senUniversity，Guangzhou510080，China) Correspondingto：YA0Shu-zhong，mail：yszfly@163．tom Abstract：O【bjective】Toestablishazebrafishxenotransplantationmodelofcervicalcancerandinvestigatethepro-angiogenic effectsofcervicalcancer．M【ethods】AlineafizedplasmidpcDNA3．0vectorexpressingDs—Redfluorescentproteinwereusedto fluorescentlylabelhumancervicalcancerSiHacells． Thefluorescent—labeledSiHacellswerethentransplantedintotheFLK48hpf transgeniczebrafishembryosusingmicroinjection．Thesurvival，proliferationandinductionofangiogenesiswereevaluatedinzebrafish xenotransplantationembryosandlarvae． R【esults】DifferentnumbersofxenografthumancervicalcancerSiHacellshaddifferent effectsonzebrafishandtransplantationof50—100CSiHacellsachievedanexcellentangiogenesis． Xenogr