《内蒙古额吉淖尔盐碱湖一株产视紫红质的极端嗜盐古菌的分离及其bop基因核心序列及最适生长条件的分析》.pdfVIP

第 14卷 第 13期 2014年5月 科 学 技 术 与 工 程 Vo1．14 No．13 May2014 1671— 1815f2014)13-0011—05 ScienceTechnologyandEngineering ⑥ 2014 Sci．Tech．Engrg． 生物科学 内蒙古额吉淖尔盐碱湖一株产视紫红质的 极端嗜盐古菌的分离及其 bop基因核心序列 及最适生长条件的分析 宋 倩 韩 瑞 宝力德 (内蒙古农业大学生命科学学院，呼和浩特 010018) 摘 要 从内蒙古额吉淖尔湖分离得到一株产视紫红质的极端嗜盐古菌，初步鉴定为属于Natrinema属；并扩增出了其bop基 因，该bop基因序列已在Genbank中注册，编号为KF863690，分析了其核心序列。结果表明bop基因开放阅读框为303bp，编 码 101个氨基酸。blastp结果表明该蛋 白属于Bac-rhodopsin蛋白家族，具有典型的细菌视紫红质蛋 白结构域。利用BLAST进 行相似性分析发现bop编码蛋白氨基酸序列与Genbank中编号AAS87571．1、WP一007110705和AFB77278．1的视紫红质蛋白 相似性达到98％以上。此结果表明视紫红质蛋白在细菌及古菌 中结构上具有很高的保守性，与其质子泵功能紧密相关。最 后分析了该菌株的最适生长条件。该菌株在分离培养基 中适宜生长的NaC1浓度范围为 1．0～3．0mol／L，适宜生长pH为 6．5—8．5，适宜生长镁离子浓度为0．4—0．8mol／L。通过分析比较得出该嗜盐古生菌株生长最适NaC1盐浓度为 1．5mol／L， 最适pH值为7．5，最适镁离子浓度为0．4mol／L。该实验结果为今后进一步研究产视紫红质的极端嗜盐古生菌株的生理生化 特征及遗传学特征奠定了基础。 关键词 极端嗜盐古菌 bop基因 细菌视紫红质 最适生长条件 中图法分类号 Q949．3； 文献标志码 B 极端环境微生物是指一些能够生长在高温、寒 嗜盐菌种类繁多。根据表型特征的不同，可分 冷、高压、强酸、强碱、高辐射、高盐等极端环境中的 为嗜盐球菌和嗜盐杆菌。根据 16SrDNA的序列并 微生物。其中极端嗜盐古菌(Extremelyhalophilic0r- 结合其他生物学形状，目前将极端嗜盐菌划分为8 chaea)通常称为嗜盐菌 (Halophilicbacteria)，划分 个属：盐杆菌属 (Halophilicbacterium)、盐深红菌属 为古菌域 (Archaeadomain)的嗜盐菌 目(Halophilic (Halobaculum)、富盐菌属 (Haloferax)、盐盒菌属 bacteriamesh)下 的嗜盐菌科 (Halophilicbacteria (Haloarcula)、盐球菌属 (Halococcus)、嗜盐碱杆菌属 Branch)。嗜盐古菌一般在盐碱湖、死海、盐场、海洋 (Natronobacterium)、钠线菌属(Natrinema)嗜盐碱球 以及盐腌制品表面等富盐环境中生长…。极端嗜 菌属(Natronococcus)E53。 盐古菌在介质盐浓度为 15％一30％中能 良好生长， 生长在高盐环境中的极端嗜盐古菌因其特殊的 最适盐浓度范围为20％～25％，在饱和盐浓度中也 适应能力使其成为研究生物对环境的适应以及生理 可以生长并且维持其结构的稳定性与完整性 J。 生化特性的良好素材，其特殊的酶和其他大分子产 这些古菌属于古生菌域，而古生菌域被称为第三生 物在食品工业、医药行业、环境整治和其它化学工业 命形式 J。极端嗜盐菌多为圆形小菌落，菌落规 等方面都具有较好的应用潜力-o。 在嗜盐古菌紫膜中含有与视觉中的视紫红质相 则、湿润、光泽，一般显示桃红、粉红、橙红、朱红等 类似的蛋 白质，称为细菌视紫红质。细菌视紫红