罗格列酮改善糖尿病血管内皮功能不全新机制.pdfVIP

摘要 研究背景和目的大量研究表明，以一氧化氮(NO)介导的内皮依赖 性舒张反应降低为主要特征的内皮功能不全是糖尿病血管并发症的早期 病理改变：内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制物一非对称性二甲基精氨酸 (ADMA)与糖尿病血管内皮功能不全和胰岛素抵抗密切相关。二甲基精 的含量而参与血管内皮功能的调节，但DDAH是否与糖尿病血管并发症 和胰岛素抵抗存在直接联系尚缺乏足够证据。大量文献报道，胰岛素增敏 剂罗格列酮不仅能改善糖尿病惠者的胰岛素抵抗和代谢紊乱，而且对其血 管并发症具有多重保护作用，但其作用机制仍不十分清楚。本研究采用大 鼠离体血管实验、糖尿病大鼠模型以及胰岛素抵抗细胞模型观察DDAH 在血管内皮功能损害、胰岛素抵抗等状态下的活性或表达的改变．探讨罗 格列酮在纠正胰岛素抵抗、抗氧化、改善内皮功能中对 血管并发痖的发生机制以及罗倍列酮增加胰岛素敏感性、改善糖尿病血管 内皮功fiE-3：全的作用机制提供新的实验证据。 方法①在离体实验部分，采用外源性制备的糖基化牛血清白蛋白 70 (AGE．BSA，1mmo[，L)孵育大鼠离体胸主动脉诱导血管内皮损害，观 张功能损害的保护作用：并检测大鼠胸主动脉组织中DDAH活性、NO 和稽质过氧化产物丙二醛的含量。②在动物实验部分，采用高脂饲养加 小制量链脲佐菌素腰腔注射的方法制备2型糖尿病大鼠模型，经罗格列酮 (3 mCk∥d)治疗8闰后，以口毅糖耐量试验来评价胰岛素敏感性，并测 定血糖、胰岛素、糖化血红蛋白及血脂等指标来反映代谢控制：检测大鼠 改变：此外，还检测大鼠胸主动脉超氧化物歧化酶(SOD)活性和血清丙 二醛含量以反映体内抗氧化与脂质过氧化水平。③在细胞实验部分，以 高浓度胰岛素(100 h后，检测 作为阳性对照。用外源性ADMA(100／amol／L)孵育细胞24 细胞对2-脱氧一D，f3H1葡萄糖的摄取量来评价细胞对胰岛素敏感性的改变， 俭测细胞【}】胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物一l(IRS．1)和葡萄糖转运 体．2(GLUT-2)和DDAH的表达。 结果①体外实验发现，AGE．BSA孵育大鼠离体胸：扛动脉环60 min，明显抑制血管的内皮依赖性舒张(54±2％坩93±3％、P0．0lvs 032±0 002坩0．095±0．003 Con)，血管组织中DDAH活性也显著降低(0 VS Con)，并伴随NO含量的降低和丙二醛水平的升高；罗 U，／gpro，P0．0l 格列酮处理后可阻止上述指标的改变。②动物实验表明，耱尿病模型组 大鼠口服糖耐量和胰岛素敏感性指数降低，并出现明显的血糖和血脂代谢 紊乱，提示2型糖尿病大鼠模型制备成功；诘尿病大鼠胸主动脉内皮依赖 性舒张反应由正常组的944-4％降至53 4-0．002w0．0874-0．004 w 显降低(0．048 Con)．血中内源 U／gpro，P0．01 4-0．06wl 254-0．15 vj 性ADMA浓度显著升高(2．09 1．tmol／L、P0．0l 低而血清丙二醛水平升高。罗格列酮治疗后可使上述指标恢复正常。③细 h后，使细胞对胰岛 胞实验揭示，用外源性ADMA孵育HepG2细胞24 素的敏感性显著降低，表现为细胞对2．脱氧．D．rH】葡萄糖的摄取量降至 58％(both 01vs