相关代谢酶的基因型及单倍型和环磷酰胺在系统性红斑狼疮病人中疗效和不良反应的相关性的研究.pdf

相关代谢酶的基冈型及单倍型与环磷酰胺在SLE病人中疗效与不是反应的相关性研究 成熟卵巢功能不全的风险低于野生型病人。在生存分析方面携带纯合型 型或杂合型病人，而获得完全肾功能缓解机率低于野生或杂合型病人。由于CPA 代谢产物的解毒具有非常重要的作用。GSTs也具有基因多态性，本实验组较早 前的研究显示其中一个噩型--GSTPI的基因多态性对CPA代谢产物的排出影响 其基因多态性可能与CPA疗效和不良反应的个体差异有关。而且，这些参与代 Nucleotide 谢CPA的基因的单核苷酸多态性(Single 连锁不平衡(Linkage (Haplotype)，这些单倍型的多态性也可能是引起CPA疗效和不良反应个体差异 的原因之一。 细胞色素P450 P450 286(cytoehrom 酶系，也是CPA代谢途径中起主要催化作用的酶，其基因型在健康人群中的分 布是研究该基因与活性关系的基础，也是研究其与药物疗效和不良反应关系的基 药物的催化代谢。CYP286的蛋白表达以及酶活性有着广泛的个体差异及种族差 异，导致这些差异的原因可能是环境因素和CYP286基因的多态性。然而，由 于缺乏特异性的探针药，到目前为止，CYP286的体内酶活性还很难评价。 人类CYP286的表达受单基因调控，到目前为止，已经有一系列CYP286 的单核苷酸多态性(SNPs)被报道，其中某些SNP位点可以导致蛋白质一级结 性，而由5号外显子上785AG编码的蛋白活性却比野生型高，4号外显子上 的516GT也使编码的CYP286蛋白活性增高。这些基因突变引起的酶活性的 改变可能使经CYP286代谢的药物体内的处置过程也发生改变，从而产生了疗 效和毒副反应的个体和种族差异。 种族差异是导致药物代谢、疗效和不良反应个体差异的重要因素。许多重要 相关代谢酶的基因型及单倍型与环磷酰胺在SLE病人中疗效与不良反应的相关性研究 大的种族差异，从而影响了相应药物在不同种族中的治疗效果。尽管已有人研究 了CYP286在高加索人，非洲人，日本人及韩国人中的基因多态性，但在中国 人群中的多态性研究仍是空白。我国是一个多民族国家，由于历史和地域的差别， 不同民族中CYP286的基因型不同，导致酶活性的差别。 本研究以人群为基础，用PCR—RFLP技术分析汉族和维吾尔族CYP286的 基因型频率在这些群体及地区中的分布情况；用LC／MS／MS的方法检测CPA及 其活性代谢物4．OHCPA的血药浓度；在此基础上，采用病例一对照研究的方法， 结合基因型与血药浓度测定，并分析SNPs形成的单倍型的多态性，对SLE病人 效和短期不良反应的影响，旨在提高CPA的疗效，降低毒副反应，为制定合理 的CPA治疗方案提供理论指导。 第一部分 细胞色素P450286基因型研究 不同地区、不同种族，CYP286的基因型频率分布差异很大。中国是个多民 族的国家，共有56个民族，其中汉族有11．59亿，占总人口的91．59％，而维吾 尔族总共有160万人口。与汉族不同，维吾尔族属于高加索人种。到目前为止， 还未见到CYP286基因型在中国人群中频率分布的详细报道。在本研究中，我 们采用PCR-RFLP的方法检测汉族与维吾尔族CYP286的基因型。 目的： 研究健康汉族人和维吾尔族人CYP286的基因多态性分布，并与其他种族 进行比较，明确种族差异。 方法： 相关代谢酶的基因型及单倍型与环磷酰胺在SLE病人中疗效与不良反应的相关性研究 2检验汉族、 算各民族基因型频率，并验证是否符合Hardy—Weinberg平衡。用x 维吾尔族及已报道的其他种族基因突变频率与有关等位基因频率的差别。 结果： 的分布频率分别是：0．034和0．027，0和0．01l，0．091和0．033，0．003和0．049， 在两个民族问的差异具有显著性(Po．05)。在两个民族中，最常见的突变等位基 1459CT在维吾尔族中的发 +I／46(25．3％)，+I／+5(5．5％)和‘6／*6(5．5％)。SNP 生频率显著高于汉族人(PO．05)，而显著低于德国高加索人(Po．05)；另一个 SNP64 的SNPs在男性和女性中的分布频率