玉米虫害诱导基因启动子研究.pdfVIP

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2015-11-30 发布于安徽
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玉米虫害诱导基因启动子研究.pdf

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量量量量量寡量鼍曼置舅舅罾罾量量皇量皇量量量量喜量曼皇_置鲁昌鲁--■■-V■’ 目录摘要………………………………………………………………………………………………………………………．．I 英文摘要……………………………………………………………………………………．11 1前言……………………………………………………………………………………………………………………．．1 1．1抗虫基因的研究进展……………………………………………………………………1 1．1．1Bc抗虫基因………………………………………………………………………．．1 1．1．2蛋白酶抑制剂基因…………………………………………………………………1 1．1．3凝集素基因………………………………………………………………………．．2 1．2植物的防御机制………………………………………………………………………．．2 1．3茉莉酸信号途径………………………………………………………………………．．3 1．4植物基因启动子………………………………………………………………………．．7 1．5本研究的目的和意义…………………………………………………………………．11 2材料与方法…………………………………………………………………………………．13 2．1材料……………………………………………………………………………………………………………．．13 2．1．1植物材料…………………………………………………………………………．13 2．1．2菌株及质粒………………………………………………………………………13 2．1．3试剂………………………………………………………………………………………………………．．13 2．1．4主要仪器设备……………………………………………………………………．13 2．1．5实验过程所用PCR引物…………………………………………………………．14 2．1．6常用培养基的配制………………………………………………………………．14 2．1．7实验所需试剂的配制………………………………………………………………14 2．1．8其它溶液配制……………………………………………………………………．16 2．2试验方法………………………………………………………………………………16 2．2．1启动子的克隆………………………………………………………………………16 2．2．2琼脂糖凝胶中DNA片段的回收(康为世纪胶回收试剂盒)……………………．．17 2．2．3在质粒载体中进行DNA克隆……………………………………………………．17 2．2．4酶切连接…………………………………………………………………………18 2．2．5质粒提取…………………………………………………………………………．19 2．2．6农杆菌感受态制备………………………………………………………………．19 2．2．7农杆菌转化………………………………………………………………………．19 2．2．8农杆菌的准备…………………………………………………………………………．20 2．2．9拟南芥种植及培养………………………………………………………………．．20 2．2．10拟南芥侵染………………………………………………。……………………20 2．2．1l转基因拟南芥的筛选……………………………………………………………20 2．2．12植物基因组DNA提取(CTAB法)…………………………………………．．21 万方数据东北农业大学理学硕士学位论文 2．2．14 RT-PCR分析……………………………………………………………………………………………21 2．2．15荧光定量PCR……………………………………………………………………22 2．2．16 GUS组织化学染色…………………………………………………………………22 2．2．17植物总蛋白提取…………………………………………………………………23 2．2．18蛋